O-fosfo-L-tirosina (OPT): novo ligante de cromatografia de interação mista para purificação de IgG humana policlonal

Resumo

Os anticorpos, importante classe de biomoléculas empregadas nas áreas médica, diagnóstico clínico, terapêutica, biossensores, entre outras, têm interessado a academia e o setor produtivo pela necessidade de se desenvolver processos de produção e purificação a serem aplicados em larga-escala. Anticorpos do tipo imunoglobulina G (IgG) têm movimentado um mercado de U$ 50 bilhões por ano, representando cerca de 6% da receita da indústria farmacêutica mundial. Dado que os processos de purificação disponíveis dessas biomoléculas são, de maneira geral, multietapas, longos, de alto custo e com baixo rendimento, justifica-se a necessidade do estudo de técnicas de baixo custo para purificá-las, como a Cromatografia de Interações Mistas ("Mixed-mode Chromatography", MMC). MMC caracteriza-se pela presença de dois ou mais tipos de interações (hidrofóbicas, eletrostáticas, ligações de hidrogênio, entre outras) entre a fase estacionária e o soluto na fase líquida, oferecendo boa seletividade e capacidade de adsorção. O objetivo deste projeto é investigar o potencial de utilização do derivado de aminoácido orto-fosfo-L-tirosina (OPT) como novo ligante de interação mista para purificação de IgG policlonal a partir do plasma humano. Serão estudados a contribuição dos grupamentos carboxilato (iônico) e fosfato-aromático (iônico-parcialmente hidrofóbico) na captura de IgG humana e o efeito das condições operacionais (sistema tamponante, pH e força iônica) na capacidade e seletividade do adsorvente. O desenvolvimento do processo de purificação de IgG por MMC é relevante, constituindo uma contribuição científica e tecnológica com potencialidade de aplicação no fracionamento do plasma e em kits para depleção de soro visando estudos proteômicos. (AU)