Avaliação da eficácia do antígeno PspA (Pneumococcal surface protein A) em modelo de co-colonização com diferentes linhagens de Streptococcus pneumoniae

Resumo

Streptococcus pneumoniae é um importante patógeno humano, causando diversas doenças graves como meningite, pneumonia, bacteremia e sepse. As vacinas atualmente disponíveis são baseadas na resposta contra o polissacarídeo capsular, mas apresentam algumas desvantagens, como o elevado custo e cobertura restrita aos sorotipos contidos nas vacinas. O uso da vacina conjugada polissacarídica 7-valente resultou em uma drástica redução de infecções causadas por sorotipos vacinais, mas houve uma rápida substituição por doença causada por sorotipos não-vacinais. Desse modo, o desenvolvimento de novas vacinas contra pneumococo continua sendo uma prioridade e estratégias alternativas estão sendo avaliadas, como o uso de antígenos proteicos. Diversas proteínas recombinantes expressas em Escherichia coli estão sendo estudadas atualmente como antígenos vacinais, destacando-se PspA (Pneumococcal surface protein A). PspA apresenta variabilidade em diferentes isolados e nosso grupo havia demonstrado que algumas variantes de PspA são capazes de induzir anticorpos com maior reatividade cruzada com as diferentes linhagens de pneumococo. Demonstramos ainda a capacidade dessas variantes de PspA em induzir proteção em modelos de desafio intranasal letal e de colonização da nasofaringe de camundongos. Propomos testar agora sua eficácia em um modelo de co-colonização da nasofaringe de camundongos utilizando isolados expressando diferentes PspAs, obtidos a partir de um mesmo background genético. Na etapa inicial deste projeto, serão construídas linhagens expressando PspA de clado 1 (PspA1) e de clado 4 (PspA4) a partir da linhagem de laboratório TIGR4 (PspA de clado 3 - PspA3), utilizando-se o "Janus Cassette" para realizar a troca alélica. Camundongos serão imunizados com PspA recombinante que induz anticorpos com baixa (PspA1, PspA2 ou PspA3) ou alta reatividade cruzada (PspA4 e PspA5) e então desafiados com a mistura de duas linhagens expressando diferentes PspAs. A distinção entre as duas linhagens será feita pela seleção de resistência a diferentes antibióticos. A hipótese é que animais imunizados com a variante que induz anticorpos com baixa reatividade cruzada seriam capazes de controlar apenas a colonização por bactérias expressando exatamente a mesma variante de PspA e seriam colonizados pelos pneumococos expressando PspA heterólogo. Já animais imunizados com a variante que induz anticorpos com alta reatividade cruzada seriam capazes de reduzir a colonização pelas duas linhagens de desafio. A utilização de uma vacina capaz de controlar a colonização por bactérias expressando diferentes PspAs levaria a uma menor probabilidade de alteração nos isolados predominantes que circulam na população, como o que ocorreu com a substituição de sorotipos prevalentes após a introdução da vacina conjugada polissacarídica. (AU)