Estudo da neuroinvasividade e neurovirulência do vírus da raiva em amostras de sistema nervoso central de bovinos

Resumo

Uma vez que o vírus da raiva não infecta todas as estruturas do SNC de modo uniforme, a detecção antigênica deste agente pela imunofluorescência direta (IFD) pode ter resultados variáveis. No entanto, há discordância na literatura sobre quais os fragmentos seriam mais indicados para esta finalidade em bovinos. Para tanto, serão utilizadas amostras de encéfalo (tálamo, córtex, hipocampo, cerebelo e tronco encefálico) de bovinos naturalmente infecta-dos, provenientes da Seção de Diagnóstico da Raiva do Instituto Pasteur, durante o período de abril de 2015 a abril de 2016. Todas as amostras utilizadas serão colhidas para fins de diagnóstico da raiva e posteriormente utilizadas para compor casuística. As amostras testa-das serão analisadas pelas seguintes técnicas: detecção antigênica pelas técnicas de IFD e imunohistoquímica (IHQ); isolamento viral em cultura celular (linhagem N2A) e por inoculação em camundongos pela via intracerebral; detecção do RNA viral pela RT-PCR convencional e quantificação da carga viral pela RT-PCR em tempo real (RT-qPCR). Serão realizados estudos comparativos da sensibilidade e especificidade diagnóstica destas diferentes técnicas. Além da análise da intensidade e verificação dos diferentes tipos de lesões histológicas nas diversas estruturas de SNC (neurovirulência), será importante verificar a distribuição antigênica ou presença de RNA viral nas diferentes porções do SNC (neuroinvasividade) pelas técnicas da IFD e IHQ ou RT-PCR e RT-qPCR, respectivamente. (AU)