Quantificação de Candida albicans, efeito de inibidores de bomba de efluxo, da N-acetilcisteína e de micelas fotoativadas e validação de um modelo in vivo de estomatite protética

Resumo

Os objetivos desta pesquisa são: 1- comparar métodos não moleculares e molecular de quantificação de Candida albicans; 2- avaliar o efeito de inibidores de sistema de efluxo microbiano na inativação de biofilmes de C. albicans resistente a fluconazol; 3- desenvolver um sistema de micelas fotoativo de curcumina e avaliar sua ação na terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT); 4- avaliar a ação antibiofilme da N-acetilcisteína (NAC) contra C. albicans; e 5- validar um modelo in vivo de estomatite protética e avaliar a expressão de citoqueratinas epiteliais. No estudo 1, serão comparados os métodos de quantificação de unidades formadoras de colônias, contagem de células no sistema In Cell Analyzer 2000 e reação em cadeia de polimerase quantitativa de culturas planctônicas de C. albicans. No estudo 2, verapamil e curcumina serão utilizados como inibidores do sistema de efluxo para avaliar a reversão da resistência ao fluconazol de C. albicans e potencialização da aPDT in vitro e in vivo. No estudo 3, será realizada a síntese e a caracterização de um sistema de micelas fotoativo contendo curcumina, e sua ação fotodinâmica contra biofilmes de C. albicans, Staphylococcus aureus resistente a meticilina e Pseudomonas aeruginosa será avaliada. No estudo 4, serão determinadas as concentrações antifúngica e antibiofilme da NAC contra C. albicans, seu sinergismo com antifúngicos e sua ação nos componentes da matriz do biofilme fúngico. No estudo 5, dispositivos acrílicos individuais serão adaptados na mucosa palatina de ratos e contaminados com diferentes espécies de Candida para indução de estomatite protética, e a expressão de citoqueratinas epiteliais será avaliada. Os dados serão analisados por concordância, correlação e regressão (estudo 1) e por análise de variância paramétrica ou não paramétrica (estudos 2, 3, 4 e 5), com ±=0,05. (AU)