Bioimpressão 3D de células-tronco neurais derivadas de astrócitos reativos

Resumo

Modelos experimentais in vitro para o estudo de processos fisiológicos e de desenvolvimento de doenças do Sistema Nervoso Central (SNC) apresentam diversas limitações, sendo a principal delas a pouca representatividade do ambiente celular tridimensional (3D). Como uma alternativa às culturas celulares bidimensionais (2D), a bioimpressão 3D surge como alternativa para produzir estruturas que mimetizam tecidos com a possibilidade de modulação do microambiente. Diversos tipos celulares podem ser utilizados na geração de estruturas bioimpressas, sendo que células-tronco são candidatas ideais para este fim. Células-tronco neurais são encontradas primariamente nos nichos neurogênicos canônicos do SNC, caracterizando assim o limitado potencial neurogênico do tecido nervoso. Recentemente, foi descrita uma alternativa para a obtenção de células-tronco neurais a partir de astrócitos reativos e a bioimpressão 3D dessas células é inédita. Os astrócitos compõem uma população heterogênea com distintas capacidades de gerar células-tronco após ativação. A análise de diferenciação e proliferação, levando em conta a heterogeneidade populacional de células-tronco derivadas de astrócitos reativos bioimpressos, poderá validar o uso deste modelo para reproduzir processos fisiológicos do SNC. Dessa forma, propomos a avaliação do cultivo de células-tronco neurais derivadas de astrócitos bioimpressas tridimensionalmente, com foco na análise da transcriptômica global por Next Generation Sequencing (NGS), além da análise quantitativa e qualitativa de diferenciação e proliferação por qPCR e imunofluorescência, comparando-as com células mantidas em ambiente 2D e provenientes de modelo in vivo. (AU)