Atividade enzimática da fosfolipase A2 de zebrafish como biomarcador de qualidade da água

Resumo

As Fosfolipases A2 são uma grande família de enzimas que tem como função hidrolisar a ligação fosfodiéster sn2 dos fosfolipídios e liberar ácidos graxos, dando ênfase aos ácidos graxos insaturados de 18 a 20 carbonos (PUFAs, w-3 e w-6) e ao ácido araquidônico (C20:4 w-6), cuja metabolização subsequente pela ciclooxigenase 2 (COX-2) gera lipídeos bioativos pró-inflamatórios e homeostáticos. Dentro do contexto atual, com a pandemia causada por Covid-19, evidenciou-se um aumento da concentração de fármacos utilizados no tratamento precoce da doença (ivermectina e cloroquina) na água de rios e lagos. A situação se agrava diante de uma epidemia de dengue e Chikungunya que vem se intensificando país, tornando-se necessária a nebulização com organofosforados (malathion) de forma recorrente. As PLA2s têm a função de atuar como ponte de ligação entre hormônios, estímulos inflamatórios e sinais de estresse fisiológico que contam com a mobilização do ácido araquidônico para mediar respostas adaptativas e fisiológicas. O zebrafish é um dos modelos animais mais utilizados em pesquisas científicas devido a homologia com o DNA humano. Assim, neste projeto pretendemos investigar a presença e função das enzimas fosfolipases A2 em zebrafish, assim como sua modulação em presença de agentes xenobióticos presentes em água doce. Então, este projeto será dividido em duas partes, a primeira será focada na atividade fosfolipásica A2, onde desenvolveremos um método simples de avaliação geral e específica para PLA2 usando técnicas colorimétricas. Além disso, construiremos um modelo in sílico da cPLA2 de zebrafish para avaliar, por meio de modelagem molecular, a interação de compostos com a cPLA2 de peixes e o efeito dos compostos xenobióticos: cloroquina, ivermectina e malathion sobre a atividade enzimática da PLA2 de Danio rerio (AU)