Detecção e caraterização molecular de Bartonella spp. em flebotomíneos e maruins na Amazônia Brasileira.

Resumo

O gênero Bartonella spp. engloba bactérias aeróbicas Gram-negativas intracelulares facultativas parasitas de eritrócitos e células endoteliais de diversos mamíferos, incluindo seres humanos. São agentes etiológicos de diversas enfermidades, tais como febre das trincheiras, doença da arranhadura do gato, angiomatose bacilar, peliose hepática, endocardite, etc. A despeito da vasta ocorrência em mamíferos ao redor do mundo, são escassos os estudos acerca da diversidade genética de Bartonella spp. em artrópodes e pouco se sabe sobre potenciais vetores. O presente estudo objetiva investigar a ocorrência e diversidade genética de Bartonella spp. em flebotomíneos e maruins na Amazônia brasileira. Para isto, serão coletadas 600 espécimes de dípteros (300 flebotomíneos e 300 maruíns) no Parque Nacional da Amazônia, estado do Pará. Os espécimes serão submetidos à extração de DNA e inicialmente à PCR convencional baseada no gene cox-1 como controle endógeno. As amostras positivas na referida PCR serão submetidas à PCR em tempo real quantitativa para Bartonella spp. baseada no gene nuoG. As amostras positivas na qPCR serão submetidas a ensaios de PCR convencional baseados nos genes gltA, ftsZ, pap-31, groEL, rpoB, ribC e região intergênica (ITS) 16-23S rRNA. As amostras positivas serão purificadas e sequenciadas pelo método de Sanger. O posicionamento filogenético das sequências obtidas será realizado por meio da construção de dendogramas. O presente estudo contribuirá para o estudo da diversidade de agentes Bartonellaceae circulantes em dípteros Nematocera presentes no território brasileiro.