Expressão heteróloga de um homólogo de PilZ para estudo da sinalização c-di-GMP em Leptospira interrogans

Resumo

As bactérias pertencentes ao gênero Leptospira são conhecidas por causar uma doença chamada Leptospirose, a qual representa um problema significativo em termos de saúde pública e é totalmente negligenciada. Por este motivo e também pelas dificuldades relacionadas à manipulação dessas bactérias em ambiente laboratorial, muitos aspectos fundamentais ainda permanecem pouco explorados. Um desses aspectos são as vias de sinalização intracelular, que são objeto de estudo neste projeto por meio da expressão heteróloga de PilZ pelo gene LIC_10128.Também, esta proteína possui um sítio de interação com o c-di-GMP e este sítio de ligação é o responsável por estes diversos aspectos vistos em bactérias gram-negativas. Determina-se então, a estrutura da proteína de interesse por meio de cristalografia, depois de clonada e expressada em E. coli. Também haverá o teste de interação com c-di-GMP, deste modo pode-se estudar o papel de LIC_10128 na interação ao c-di-GMP e tentar determinar a sua estrutura tridimensional na forma apo e em complexo com c-di-GMP, já que a proteína de domínio PilZ não tem função conhecida descrita na literatura, assim qualquer informação obtida na realização deste projeto poderá contribuir para o melhor entendimento da rede de sinalização via c-di-GMP.