Consolidação de uma plataforma pré-clínica que combina imagens de fluorescência de células em tempo real e culturas organotípicas frescas de tecidos humanos para avaliar a eficácia e toxicidade das células T-CAR contra tumores sólidos

Resumo

As terapias baseadas em biologia sintética para modificar linfócitos T para expressar receptores quiméricos de antígenos (CAR) surgiram como abordagens revolucionárias para o tratamento de malignidades hematológicas, as quais foram estabelecidas como alternativa terapêutica para pacientes recidivantes e/ou refratários. Todavia, a eficácia terapêutica de células T-CAR ainda é baixa contra tumores sólidos. O tratamento para estes tipos de tumores é desafiador devido ao complexo microambiente tumoral que afeta negativamente a infiltração e persistência das células CAR injetadas. Para superar estes obstáculos, é essencial adquirir características desejáveis, como ativação potente e persistência prolongada, as quais estão intimamente relacionadas ao perfil de diferenciação das células T. No entanto, a expansão ex vivo durante o período de manufatura de células T-CAR afeta a capacidade de diferenciação e proliferação, levando a disfuncionalidades. Outra limitação crucial envolve a toxicidade on-target off-tumor, ou seja, efeitos deletérios em tecidos saudáveis pelas células T-CAR, o que pode levar a severos e potentes efeitos adversos com risco de vida aos pacientes. A falta de plataformas pré-clínicas preditivas e confiáveis para um melhor entendimento do comportamento das células T-CAR contra tumores e tecidos saudáveis indicam um obstáculo significativo para o sucesso da implementação desta estratégia terapêutica. A caracterização usual das células T-CAR é conduzida essencialmente através de técnicas de citometria de fluxo e transcriptoma. Porém, estas técnicas não abrangem aspectos espaciais e de cinética de resposta das células T no microambiente. Sendo assim, nós propomos o desenvolvimento de uma plataforma pré-clínica que combina técnicas avançadas de monitoramento de células em tempo real e tecidos humanos frescos para elucidar a dinâmica de células T em diferentes estágios de diferenciação e prever efeitos citotóxicos fora do sítio tumoral. (AU)