Análise Integrada de Todo o Transcriptoma do Músculo Esquelético em Camundongos knockout para LincRNA-p21

Resumo

O músculo esquelético é o tecido mais abundante e com funções vitais no organismo. A proliferação e diferenciação de mioblastos são as etapas chave durante o desenvolvimento do músculo esquelético, além de contribuírem para a regeneração e o crescimento muscular em adultos. Por outro lado, alterações na miogênese podem estar relacionadas a muitos distúrbios musculares, em que alterações na capacidade regenerativa desempenham um papel crucial na progressão de doenças. Portanto, a identificação de novos componentes que controlam esses processos podem contribuir para a compreensão dos mecanismos de desenvolvimento muscular e potencialmente permitir a identificação de novos alvos terapêuticos. A descoberta de que 98% do genoma humano, embora transcrito, não codifica proteínas foi crucial para reconhecer o papel dos RNAs não codificantes longos (lncRNAs) como reguladores críticos da função celular em nível epigenético, transcricional e pós-transcricional. Embora estudos indiquem que lncRNAs desempenham papéis chave sobre a estrutura e função tecidual, seu papel na regulação miogênica, controle de massa e regeneração muscular permanece pouco conhecido. Ainda, anormalidades de lncRNAs têm sido diretamente ligados à biologia e doença do músculo esquelético. O lincRNA-p21 está envolvido em diversos processos celulares via regulação da expressão de múltiplos genes alvo; no entanto, sua expressão e efeitos no músculo esquelético são desconhecidos. Portanto, o principal objetivo deste estudo é investigar o impacto da deleção de lincRNA-p21 nas adaptações miogênicas, fenotípicas, funcionais, regenerativas e moleculares do músculo esquelético, e fornecer conhecimento adicional sobre como os processos transcricionais e pós-transcricionais são integrados para orquestrar essas alterações musculares. Nesta etapa do estudo a ser realizado com o Sprint, avaliaremos o transcriptoma do músculo esquelético em camundongos knockout para lincRNA-p21 com foco na análise integrativa da rede lncRNA-miRNA-mRNA. Em seguida, será analisada a caracterização molecular no músculo esquelético de camundongos knockout para lincRNA-p21, a fim de avaliar genes e vias de sinalização relacionados às alterações estruturais e funcionais encontradas. Além disso, avaliaremos a recuperação do fenótipo muscular via terapia gênica utilizando entrega de AAV9 em animais com deleção de lincRNA-p21. Assim, o estudo sobre o lincRNA-p21 pode levar à identificação de circuitos moleculares que são controlados por RNAs durante o processo de diferenciação do músculo esquelético e que, quando desregulados, levam a eventos patológicos. Essas descobertas fornecerão insights que podem auxiliar no conhecimento de muitos conceitos básicos dos mecanismos moleculares envolvidos na homeostase do músculo esquelético e no desenvolvimento de novas intervenções terapêuticas para doenças musculares. (AU)