Otimização da produção de VLP de vírus Zika em meio quimicamente definido utilizando os princípios de Quality by Design

Resumo

Responsável por causar uma série de doenças congênitas em humanos, como microcefalia em recém-nascidos e síndrome de Guillain-Barré em adultos, o vírus Zika (ZIKV) começou a se espalhar pelas Américas em 2015 se tornando rapidamente um problema de saúde pública em pelo menos 33 países do continente. Tal epidemia gerou demanda para a formulação de profilaxias contra esse agente infeccioso. Nesse cenário, o desenvolvimento de vacinas seguras e eficazes para atenuar ou neutralizar as consequências da infecção por ZIKV tornou-se fundamental. Infelizmente, ainda não há nenhuma vacina aprovada que forneça imunização contra o ZIKV. Diante do exposto, as partículas semelhantes a vírus (VLPs), nanoestruturas compostas por proteínas virais capazes de se auto-montar, se revelam como candidatas vacinais contra o ZIKV. Esse produto biotecnológico mimetiza o vírus, induzindo resposta imune, mas em seu interior não há qualquer material genético viral, fazendo com que a partícula não seja infecciosa. O presente projeto objetiva produzir e caracterizar VLPs de ZIKV através do sistema de expressão células Sf9/baculovírus recombinante em meio quimicamente definido utilizando estratégias de Quality by Design como ferramenta para otimização desse bioprocesso. Para que o trabalho esteja em sintonia com o modelo de produção biofarmacêutico, inicialmente, será necessário avaliar e otimizar, em frascos agitados (cultura em suspensão) a multiplicidade de infecção viral (MOI) e o tempo de infecção (TOI), além do tempo de colheita (HT), do baculovírus recombinante carregando os genes das proteínas estruturais do ZIKV (BV-E-ZIKV) para melhor expressão das VLPs em quantidade e tamanho através de delineamento experimental. Em seguida, utilizando um biorreator operando de forma descontínua, serão estudados e otimizados, também por delineamento experimental, a concentração de oxigênio dissolvido no meio e a temperatura para expressão de VLPs. Em paralelo os nutrientes e metabólitos serão monitorados de forma off-line em ambos experimentos.