Análises do Perfil Inflamatório e da Permeabilidade Intestinal Associadas à Composição da Microbiota Intestinal após Suplementação de Prebiótico, Probiótico e Simbiótico em Ratos Desnutridos

• Processo: 18/08873-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2019
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2022
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Nutrição
• Pesquisador responsável: Claudia Cristina Alves Pereira
• Beneficiário: Claudia Cristina Alves Pereira
• Instituição Sede: Instituto de Saúde e Sociedade (ISS). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus Baixada Santista. Santos , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Dan Linetzky Waitzberg
• Assunto(s): Probióticos Simbióticos Desnutrição Ratos Expressão gênica Prebióticos Estudos experimentais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: desnutrição | expressão gênica | prebióticos | probioticos | Ratos | Simbióticos | Experimental

Resumo

O objetivo do presente estudo é avaliar os efeitos da suplementação de prebiótico, probiótico e simbiótico sobre o perfil inflamatório e de permeabilidade intestinal em ratos submetidos à desnutrição.Ratos machos da linhagem Lewis (N=80) serão divididos em 2 subgrupos experimentais, Nutridos (n=40) e Desnutridos (n=40). No 10º dia de experimento, os animais serão novamente subdivididos em 8 grupos, mantendo-se a condição de nutrição ou desnutrição: Controle Negativo [CN] (n=10): Dieta oral padrão + gavagem (Gv) com água; Controle Positivo [CP] (n=10): Dieta oral ad libitum + Gv com água; Grupo prebiótico [PRE] (n=10): Dieta oral ad libitum + Gv com prebiótico; Grupo probiótico [PRO] (n=10): Dieta oral ad libitum + Gv com probiótico. Grupo simbiótico [SIM] (n=10): Dieta oral ad libitum + Gv com simbiótico. No 25º dia após tratamento nutricional os ratos serão sacrificados e serão coletadas amostras sanguíneas destinadas à dosagem do perfil de citocinas (IL-1B, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-alfa e INF-³) e para determinar os níveis plasmáticos de proteína C reativa, proteínas totais e albumina. Amostras do tecido intestinal (cólon) serão destinadas a identificar alterações histopatológicas e de expressão gênica. A análise da expressão gênica será determinada por meio de PCR em tempo real por meio da quantificação relativa dos genes envolvidos na permeabilidade intestinal em que identificaremos a expressão de proteínas que fazem parte das junções oclusivas e aderentes como a ocludina, claudinas 1 e 2, E-caderina, zonula ocludente 1 e JAM-A. Ainda, para analisar a expressão gênica intestinal de marcadores inflamatórios identificaremos o perfil de expressão gênica intestinal de TLR-4, TLR-9, GPR43, MyD88, NFkB e citocinas IL-1B, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-alfa e INF-³ . A partir da coleta das fezes analisaremos a expressão gênica de bactérias presentes na microbiota intestinal e determinaremos a concentração de ácidos graxos de cadeia curta (AGCC). Para todos os dados obtidos serão realizados testes estatísticos com análise de variância, considerando p < 0,05. (AU)