Construção de sistema em levedura que reproduz a supressão da morte celular programada mediada pela proteína HSP27 humana

• Processo: 19/24988-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2020
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2023
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica
• Pesquisador responsável: José Ribamar dos Santos Ferreira Júnior
• Beneficiário: José Ribamar dos Santos Ferreira Júnior
• Instituição Sede: Escola de Artes, Ciências e Humanidades (EACH). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Apoptose Leveduras Morte celular Proteínas de choque térmico HSP27 Neoplasias Saccharomyces cerevisiae
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: apoptose | câncer | fatores pró-apoptóticos | Hsp27 | Saccharomyces cerevisiae | Apoptose

Resumo

Apoptose é um processo ativo de morte celular altamente organizado que auxilia a organogênese e a remodelação tecidual, durante o desenvolvimento embrionário. No sistema imune, a apoptose participa da seleção negativa de células da linhagem linfoide, e elimina células neoplásicas e infectadas por vírus, pela ação de linfócitos T citotóxicos e células natural killer. Alterações nos mecanismos indutores ou inibidores da apoptose são causas de doenças que levam à neurodegeneração, autoimunidade e ao câncer. Em mamíferos, HSP27 é uma chaperona molecular envolvida na remodelação de agregados proteicos e no aumento da sobrevivência celular. Sua função citoprotetora está relacionada com a supressão das vias da apoptose por interação com proteínas pró-apoptóticas como Bax, Bak e tBid, além de fatores apoptogênicos como o citocromo c e com as caspases iniciadoras. Em algumas neoplasias, HSP27 torna-se superexpressa e inibe a apoptose de células tumorais, favorecendo a oncogênese e a resistência ao tratamento quimioterápico. O objetivo deste projeto é construir um sistema em Saccharomyces cerevisiae que reproduz a supressão da morte celular programada mediada pela proteína HSP27 humana. Será utilizado peróxido de hidrogênio ou ácido acético para induzir a morte celular programada, quando serão medidas, ao longo do tempo, a viabilidade celular, liberação de citocromo c, exposição de fosfatidilserina na face exoplasmica da membrana citoplasmática, a atividade da metacaspase Yca1p e verificado se HSP27 suprime o fenótipo de morte por expressão de fatores pró-apoptóticos. Validar este sistema determina futura estratégia para rastreamento de pequenas moléculas inibidoras da supressão da apoptose por HSP27, que potencialmente atuariam contra neoplasias. (AU)