Células-tronco pluripotentes induzidas in vitro bovinas geradas e mantidas em 5 ou 20% de oxigênio e diferentes suplementações

• Processo: 21/06178-2
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2021
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2022
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Fabiana Fernandes Bressan
• Beneficiário: Fabiana Fernandes Bressan
• Instituição Sede: Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 15/26818-5 - Investigação de mecanismos celulares e moleculares da aquisição da toti- e pluripotência induzida in vitro - modelo translacional, AP.JP
• Assunto(s): Medicina regenerativa Células-tronco
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Células de pluripotência induzida | iPS | Medicina regenerativa | Células-tronco

Resumo

O evento de reprogramação celular à pluripotência é influenciado por vários fatores, tais como condições de cultura in vitro (por exemplo, meio de cultura e concentração de oxigênio). Neste estudo iPSCs bovinas (biPSCs) foram geradas em diferentes tensões de oxigênio (5% ou 20% de oxigênio) e suplementação (bFGF ou bFGF + LIF + 2i - bFL2i) para avaliar a eficiência da indução e manutenção da pluripotência in vitro. A reprogramação inicial foi observada em todos os grupos e a suplementação com bFL2i resultou inicialmente em um número superior de colônias. No entanto, a suplementação com bFL2i em baixo oxigênio levou a uma perda de autorrenovação e manutenção da pluripotência. Todas as linhas clonais foram positivas para fosfatase alcalina; eles expressaram genes relacionados à pluripotência endógena SOX2, OCT4 e STELLA. No entanto, a expressão foi diminuída ao longo das passagens sem a influência da tensão de oxigênio. GLUT1 e GLUT3 foram regulados positivamente por baixo teor de oxigênio. As biPSCs foram coradas com imunofluorescência positiva para OCT4 e SOX2 e formaram corpos embrioides que se diferenciaram em ectoderme e mesoderme (todos os grupos), bem como endoderme (uma linha de bFL2i em alto oxigênio). Nosso estudo é o primeiro a comparar ambientes de alto e baixo oxigênio durante e após a reprogramação induzida em bovinos. Em nossas condições, um ambiente de baixo oxigênio não favoreceu a manutenção da pluripotência das biPSCs. (AU)