Efeitos da restrição de crescimento intrauterino sobre o perfil de proteínas modificadas por O-GlcNAcilação (O-GlcNAc) no hipotálamo de ratos adultos

• Processo: 20/11985-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2022
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2024
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Nutrição - Desnutrição e Desenvolvimento Fisiológico
• Pesquisador responsável: Eliane Beraldi Ribeiro
• Beneficiário: Eliane Beraldi Ribeiro
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Alexandre Keiji Tashima ; Giuseppe Palmisano ; Monica Marques Telles
• Auxílio(s) vinculado(s): 24/03187-9 - 31st European Congress on Obesity - ECO 2024, AR.EXT
• Assunto(s): Programação metabólica Processamento de proteína pós-traducional Oxigênio-glicosilação N-acetilglucosamina Recém-nascido de baixo peso Ingestão de alimentos Obesidade
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: baixo peso ao nascer | Desnutrição Intrauterina | Ingestão alimentar | obesidade | O-GlcNAc | Programação metabólica | Modificação pós-traducional de proteínas

Resumo

É bem estabelecida na literatura a relação entre condições nutricionais adversas durante a gestação e o aparecimento de desordens metabólicas na vida adulta. Diversos estudos mostram que o desenvolvimento da obesidade induzida pela restrição do crescimento intrauterino (IUGR) está relacionado a alterações hipotalâmicas. Em estudo prévio mostramos que a IUGR induziu alterações no metabolismo da glicose e aumento no fluxo da via de biossíntese de hexosamina (HBP) no hipotálamo de ratos adultos. A HBP integra o metabolismo de carboidratos, aminoácidos, ácidos graxos e nucleotídeos no processo de síntese de UDP-GlcNAc, metabólito que é o substrato para a O-glicosilação (O-GlcNAc) de proteínas. A O-GlcNAc é uma modificação pós-traducional (PTM) reversível, dependente da disponibilidade de glicose, que regula a atividade de proteínas nucleares e citoplasmáticas, e que tem papel importante em diversas vias de sinalização celular. Não encontramos estudos que avaliaram se a IUGR afeta o perfil de proteínas O-GlcNAc no hipotálamo. O presente projeto tem como objetivo verificar se a O-GlcNAcilação de proteínas hipotalâmicas é um mecanismo molecular envolvido na gênese dos distúrbios metabólicos tardios induzidos por IUGR. Para isso, utilizaremos ratas Wistar que receberão durante toda a gestação apenas metade do alimento consumido pelas ratas controles no mesmo dia de gestação. Nos filhotes machos, controles e desnutridos, avaliaremos semanalmente o peso corporal desde o nascimento até os 120 dias de idade, quando, após injeção intraperitoneal de solução salina ou de glicose, serão sacrificados. Os hipotálamos serão coletados e avaliaremos o perfil de proteínas hipotalâmicas modificadas por O-GlcNAc através de LC-MS/MS, a expressão das enzimas glutamina:frutose-6-fosfato amidotransferase (que controla o fluxo da HBP), O-GlcNAc transferase e O-GlcNAcase (que controlam o processo de O-GlcNAcilação) através de western blot, e a localização de proteínas modificadas por O-GlcNAc nas distintas áreas hipotalâmicas através de imunofluorescência. O melhor entendimento das alterações moleculares relacionadas ao desenvolvimento da obesidade pela IUGR pode, futuramente, propiciar a identificação de novos alvos terapêuticos, auxiliar no desenvolvimento de medicamentos para o tratamento dessa condição, assim como auxiliar na elaboração de políticas públicas mais adequadas para sua prevenção. (AU)