Hipotermia moderada como estratégia para aumentar a criotolerância do embrião bovino produzido in vitro

• Processo: 22/10065-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2025
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Acordo de Cooperação: CONFAP - Conselho Nacional das Fundações Estaduais de Amparo à Pesquisa
• Pesquisador responsável: Marcos Roberto Chiaratti
• Beneficiário: Marcos Roberto Chiaratti
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Rafael Vilar Sampaio ; Ricardo Perecin Nociti
• Bolsa(s) vinculada(s): 24/21740-7 - Determinação de alterações na cromatina e no transcriptoma de embriões bovinos expostos ao choque frio e congelamento lento, BP.TT; 23/02285-4 - Determinação de alterações na cromatina e no transcriptoma de embriões bovinos expostos ao choque frio e congelamento lento, BP.TT
• Assunto(s): Criobiologia Congelamento de sêmen animal Embrião Bovinos Expressão gênica Peptídeos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: bovino | cold shock proteins | Congelamento | embrião | expressão gênica | Pive | Criobiologia

Resumo

A produção in vitro de embriões (PIVE) bovinos é uma das biotécnicas reprodutivas mais utilizadas, ocupando o Brasil a posição de vice-líder mundial no uso da técnica. A criopreservação do embrião é fundamental para o armazenamento de embriões excedentes e viabilização do comércio de embriões, porém, sua eficácia é reduzida, com resultados de sobrevivência pós-congelação variados. A criotolerância pode ser influenciada por indução de um moderado estresse ao frio, de modo a preparar o embrião para o congelamento. Células de mamíferos possuem um mecanismo intracelular de resposta protetora ao frio, orquestrado por proteínas de choque frio (cold shock proteins) que são expressas de forma rápida em resposta a temperatura abaixo da fisiológica. Aqui, propomos investigar os efeitos celulares e moleculares da exposição de embriões PIVE de bovinos à hipotermia (cold priming), o que esperamos ter efeito protetor durante a criopreservação. Nossa hipótese é que o cold priming irá induzir uma rápida resposta adaptativa, de ordem epigenética e transcriptômica, ao frio (incluindo a expressão das cold shock proteins), aumentando a criotolerância dos embriões PIVE. Na 1ª fase (UFPA), os embriões PIVE de bovinos serão produzidos, submetidos ou não ao cold priming, então congelados/descongelados, e avaliados quanto a expansão, eclosão, número de células, e apoptose. Na 2ª fase (UFSCar), embriões do grupo experimental que melhor responderam ao cold priming e a congelação, incluindo seus controles, serão analisados quanto a taxa de concepção, perfil da cromatina (ATAC-Seq), transcriptoma (RNA-Seq). Western blotting, microscopia de fluorescência, entre outras abordagens dependendo dos achados, serão utilizados para confirmar/explorar os resultados. A presente abordagem é inédita e espera-se contribuir com um protocolo mais eficiente de congelação de embriões, beneficiando o agronegócio dos estados do Pará e São Paulo, e do Brasil como um todo. (AU)