Uso de Microscopia de Alta Resolução para Investigar o Papel Funcional do Exosome em Complexos Sub-nucleolares

• Processo: 23/00368-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2023
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2025
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Acordo de Cooperação: CNRS
• Proposta de Mobilidade: SPRINT - Projetos de pesquisa - Mobilidade
• Pesquisador responsável: Carla Columbano de Oliveira
• Beneficiário: Carla Columbano de Oliveira
• Pesquisador Responsável no exterior: Olivier Gadal
• Instituição Parceira no exterior: Moléculaire, Cellulaire et du Développement (MCD), França
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 20/00901-1 - Controle pós-transcricional de expressão gênica: processamento de pré-rRNA, degradação de mRNA, splicing e montagem de snoRNPs em Saccharomyces cerevisiae, AP.TEM
• Assunto(s): Exossomos Processamento de RNA RNA polimerase I Controle da expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biossíntese de ribossomos | Complexos RNA-Proteínas | exossomo | Microscopia de alta resolução | processamento de RNA | RNA polimerase I | Controle de Expressão Genica

Resumo

A síntese de ribossomos é um processo que demanda muita energia e que é iniciado com a transcrição dos RNAs ribossomais precursores (pré-rRNAs) no nucléolo em células eucarióticas. RNA polimerase I transcreve o pré-rRNA que contém as sequências dos rRNAs maduros 18S, 5.8S e 25/28S, enquanto que RNA polimerase III transcreve o pré-rRNA 5S. Estes pré-rRNAs passam por várias reações de processamento que incluem modificações de nucleotídeos e clivagens endo- e exonucleolíticas, para então dar origem aos rRNAs maduros. Estes, junto com aproximadamente 80 proteínas ribossomais, vão formar as subunidades ribossomais 40S (menor) e 60S (maior). Uma da exonucleases que participam do processamento de pré-rRNA é o exossomo, um complexo formado por até 14 subunidades em levedura, que é responsável pelo processamento inicial do pré-rRNA 7S para formar o rRNA maduro 5.8S e pela degradação do espaçador 5'-ETS depois da sua liberação do transcrito primário de rRNA.Em um trabalho recente de colaboração entre nossos grupos de pesquisa, a localização do exossomo de levedura foi estudada, durante o qual foi observado que o exossomo, apesar de nucleolar, estava excluído da região sub-nucleolar enriquecida em RNA polimerase I. Estes resultados preliminares são novos e muito interessantes e para entender o papel funcional do exossomo nesses sub-compartimentos nucleolares, estamos propondo continuar estes estudos, o que poderá ajudar no entendimento da regulação do processamento de pré-rRNA e do controle de qualidade ribossomal, assim como da separação de complexos no nucléolo. Este projeto também proporcionará o fortalecimento da colaboração entre nossos grupos. (AU)