Urease: produção de proteína recombinante e desenvolvimento de inibidores para terapia antifúngica contra criptococose

• Processo: 24/02673-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2026
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
• Proposta de Mobilidade: SPRINT - Projetos de pesquisa - Mobilidade
• Pesquisador responsável: Kelly Ishida
• Beneficiário: Kelly Ishida
• Pesquisador Responsável no exterior: Angela Gelli
• Instituição Parceira no exterior: University of California, Davis (UC Davis), Estados Unidos
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 23/12190-0 - Moléculas com potencial antifúngico sobre Candida e Cryptococcus e investigação dos mecanismos de ação: inibição e morte celular, AP.R
• Assunto(s): Antifúngicos Cryptococcus neoformans Pichia pastoris Proteínas recombinantes Urease
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Atividade antifúngica | Cryptococcus neoformans | Inibidores de Urease | Pichia pastoris | proteína recombinante | urease | Micologia e Antifúngicos

Resumo

Espécies de Cryptococcus são os agentes etiológicos da criptococose, sendo a forma cerebral a mais frequente e grave em pacientes HIV/AIDS, o que impacta em altas taxas de mortalidade e morbidade. Embora haja terapia antifúngica para a criptococose, ainda é pouco efetiva devido a limitada opção de antifúngicos, aos efeitos colaterais, a farmacocinética desfavorável e ao aumento de isolados resistentes aos antifúngicos disponíveis. Dessa forma, nosso grupo de pesquisa tem buscado alternativas para o tratamento da criptococose, sendo uma delas o desenvolvimento de inibidores da enzima urease de Cryptococcus. A urease catalisa a hidrólise da ureia em amônia, que está associada ao aumento da sobrevivência de leveduras dentro dos macrófagos e ao enfraquecimento da barreira hematoencefálica que facilita a entrada do patógeno para o tecido cerebral, passo importante no estabelecimento da meningite criptocócica. Considerando que a urease é naturalmente ausente em humanos, a inibição enzimática pode ser uma estratégia interessante no estudo de agentes anti-Cryptococcus; entretanto, a sua estrutura tridimensional ainda não é conhecida. Dessa forma, este projeto tem como objetivo produzir a urease recombinante de C. neoformans utilizando o sistema de expressão eucariótica com Pichia pastoris para caracterização e elucidação de sua estrutura e desenvolver inibidores potentes para investigar a atividade antifúngica in vitro e in vivo na busca de alternativas terapêuticas para o tratamento da criptococose. (AU)