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Desenvolvimento de um teste diagnóstico respiratório baseado em proteínas do condensado do ar exalado: uma abordagem acessível e não invasiva.

Processo: 25/13818-9
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2025
Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2026
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
Pesquisador responsável:Giuseppe Palmisano
Beneficiário:Giuseppe Palmisano
Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:18/15549-1 - Modificações pós-traducionais nos processos biológicos e no diagnóstico da Doença de Chagas: novas abordagens metodológicas e implicações biológicas, AP.JP2
Assunto(s):Biomarcadores  Espectrometria de massas  Proteínas 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Biomarkers | diagnostic test | exhaled breath condensate | mass spectrometry | proteins | biomarcadores

Resumo

Doenças respiratórias (DRs), incluindo infecções virais como a Covid-19 e condições crônicas, representam um grave problema de saúde pública, tendo sido a terceira maior causa de mortes no mundo em 2019, com 454,6 milhões de casos registrados. O monitoramento dessas doenças requer métodos não invasivos, que são preferidos pelos pacientes e representam uma área importante de desenvolvimento científico. Neste contexto, este projeto propõe o desenvolvimento de um método acessível para coleta e análise do condensado do ar exalado (EBC) como ferramenta diagnóstica inovadora.O EBC surge como uma matriz biológica promissora, contendo proteínas, metabólitos e mediadores inflamatórios que refletem com precisão o estado fisiológico e patológico do sistema respiratório. Sua principal vantagem é a natureza não invasiva, contrastando fortemente com procedimentos como broncoscopias e biópsias pulmonares. Estudos recentes demonstram a aplicabilidade do EBC na identificação de biomarcadores para diversas condições, como asma, onde níveis elevados de citocinas pró-inflamatórias se correlacionam com a gravidade da doença; fibrose cística, na qual proteases específicas e marcadores de estresse oxidativo fornecem informações sobre progressão e resposta terapêutica; e câncer de pulmão, onde alterações em proteínas como p53 e citoqueratinas podem auxiliar no diagnóstico precoce.Apesar desse potencial, a aplicação clínica rotineira do EBC ainda enfrenta desafios significativos. A padronização dos protocolos de coleta e armazenamento é crucial para evitar a degradação de biomarcadores e garantir a reprodutibilidade dos resultados. Além disso, as técnicas analíticas empregadas precisam apresentar sensibilidade suficiente para detectar moléculas em concentrações extremamente baixas, o que representa uma barreira técnica importante.Este projeto visa superar essas limitações através do desenvolvimento de protocolos padronizados para coleta de EBC, seguidos por análise proteômica utilizando eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) e espectrometria de massas (LC-MS/MS). A etapa final envolve a criação de um pipeline bioinformático para processamento e interpretação dos dados, com o objetivo de estabelecer um perfil proteico do EBC em indivíduos sem doenças respiratórias. Essa abordagem integrada permitirá a descoberta de alvos diagnósticos e terapêuticos.O desenvolvimento desta metodologia tem como objetivo final implementar uma ferramenta não invasiva, acessível e reprodutível para o potencial diagnóstico precoce de doenças respiratórias, oferecendo uma alternativa valiosa aos métodos tradicionais e contribuindo para melhores resultados clínicos. A padronização desta técnica poderá abrir novas perspectivas para o monitoramento personalizado de pacientes e para a pesquisa translacional. (AU)

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