Biotérios e Biossegurança - Faixa "D", Modernização e ampliação do Laboratório de Criopreservação e modificação genômica de zigotos de roedores.

• Processo: 25/07917-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Programa Infraestrutura - Melhoria da Infraestrutura de Funcionamento de Biotérios de Pequenos Animais e da Biossegurança
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2028
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Bioquímica e Molecular
• Pesquisador responsável: Thiago Mattar Cunha
• Beneficiário: Thiago Mattar Cunha
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: Ribeirão Preto
• Pesquisadores associados: Fernando de Queiroz Cunha ; Gustavo Henrique Goldman ; Isadora Marques Paiva ; Larissa Dias da Cunha ; Márcio Mateus Beloti ; Pietro Ciancaglini
• Assunto(s): Camundongos Proteína 9 associada à CRISPR Criopreservação Repetições palindrômicas curtas agrupadas e regularmente espaçadas Organismos geneticamente modificados
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Camundongos | Cas9 | Criopreservação | Crispr | Transgenicos | Zigostos | Engenharia genética de animais de laboratório

Resumo

A reprodução assistida, bem como a manipulação genética de embriões de camundongos são hoje de extrema importância para a pesquisa biomédica e translacional. Neste panorama, o presente projeto propõe a modernização e ampliação do Laboratório de Criopreservação e Manipulação Genética de Zigotos de roedores (LCMG) da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo (FMRP-USP). Este laboratório vem sendo coordenado pelo Professor Thiago Mattar Cunha desde de 2015 quando surgiu com a intenção de derivar as linhagens do Centro de Criação de Camundongos Especiais da FMRP, além de estabelecer protocolos de fertilizações in vitro, e congelamento/descongelamento de embriões de camundongos. Nesses anos de funcionamento, o LCMG já derivou mais de 120 linhagens de camundongos geneticamente modificados para grupos de pesquisa na USP e de fora. Além das derivações, o laboratório já congelou embriões de mais de 100 linhagens, e espermas de outras 27 linhagens. Com essa experiência na realização de processos de fertilização in vitro, bem como transferência de embriões, o próximo desafio seria realizar modificações genômicas nestes embriões para geração de animais geneticamente modificados. Após aquisição de financiamento, foi possível adquirir os equipamentos necessários para os procedimentos de injeção pronuclear e, mais recentemente, para eletroporação de zigotos. Desde seu estabelecimento em 2022, já foram geradas 5 linhagens de animais geneticamente modificados utilizando CRISPR/Cas9 e temos mais duas em desenvolvimento, as quais foram demandas de diferentes pesquisadores, tanto da FMRP, USP, quanto de instituições externas. Com toda a capacidade demonstrada até aqui, visamos com esse projeto a expansão da criação de linhagens SPF e também do desenvolvimento de animais geneticamente modificados. Para isso, já demos o primeiro passo com início da ampliação da estrutura física do LCMG junto a prefeitura do campus da USP de Ribeirão Preto. Com isso, objetivamos modernizar o laboratório pela inclusão de uma facility para produção de vírus adeno-associados (AAVs), utilizados hoje como carreadores de DNA molde para recombinação em casos de desenvolvimento de animais transgênicos. E ainda, uma outra facility para genotipagem dos animais gerados, evitando o deslocamento de amostras para outros laboratórios da instituição. Dada essa ampliação da estrutura e trabalho, também pretendemos fazer capacitação técnica de todos os envolvidos e melhorar os serviços prestados a comunidade científica interna e externa. Para concluir, esperamos que esse projeto leve ao aumento da produção científica de impacto, maior visibilidade e reconhecimento em publicações, fortalecimento de colaborações, e consolidação do Brasil, especialmente o estado de São Paulo, como um protagonista em pesquisa biomédica avançada. (AU)