Estudo de hepatócitos de rato em cultura primária submetidos à injúria celular: análise do efeito da hipóxia e reoxigenação, invasão bacteriana (Salmonella sp.), mecanismo de morte predominante (necrose ou apoptosis), produção de FNT alfa e efeito de substâncias citoprotetoras

• Processo: 99/02080-2
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 1999
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2001
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Dahir Ramos de Andrade Júnior
• Beneficiário: Dahir Ramos de Andrade Júnior
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Salmonella Morte celular Modelos animais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Citoprotetores | Fnt Alfa | Hepatocito | Hipoxia / Reoxigenacao | Necrose / Apoptosis | Salmonella

Resumo

O comportamento da célula hepática sob injuria será estudado utilizando a técnica de cultura primária de hepatócltos de ratos (fêmeas wistar recém-nascidas). Esta metodologia foi padronizada pelo nosso grupo desde 1988. No dia 5 de cultura submetemos os hepatócitos a micro-ambientes de hipóxia (com uso de N2) e reoxigenação (com gás carbogênio). A lesão celular será medida com critérios funcionais (dosagem de DHL e viabilidade celular) e morfológicos. Avaliaremos a injúria dos hepatócitos por invasão bacteriana utilizando Salmonella sp., com estudo da liberação de FNT alfa no meio de cultura pelo bioensaio, detecção da presença da morte celular por apoptosis com corante Hoechst, e pesquisa do efeito de citoprotetores. (AU)