Aplicação de técnicas moleculares para detecção e caracteização de vírus da videira

• Processo: 01/05936-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2001
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2003
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Agronomia - Fitossanidade
• Pesquisador responsável: José Osmar Gaspar
• Beneficiário: José Osmar Gaspar
• Instituição Sede: Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José do Rio Preto. São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Diagnóstico de doenças em plantas Técnicas de diagnóstico molecular Vírus de plantas Microscopia eletrônica Análise do polimorfismo de comprimento de fragmentos amplificados Reação em cadeia por polimerase (PCR) Videiras
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Caracterizacao Molecular | Diagnostico | Microscopia Eletronica | Videira | Vitis

Resumo

O presente projeto tem como objetivo a utilização de técnicas moleculares para a detecção e caracterização de vírus que infectam a videira. Como estratégia, "primers" descritos na literatura serão sintetizados e utilizados para amplificação de fragmentos genômicos virais por PCR. Se necessário, outros "primers" serão desenhados e sintetizados. Os fragmentos serão clonados e sequenciados para a determinação da identidade viral e consequente determinação do grau de homologia com os respectivos vírus já sequenciados em outros países. Sondas moleculares não radioativas serão produzidas a partir dos fragmentos clonados por incorporação de digoxigenina-dUTP. Em certos casos, os fragmentos clonados serão expressos em bactéria com a finalidade de produzir proteínas virais que possam ser utilizadas na produção. de anticorpos. Caracterização de proteínas estruturais e não estruturais será também feita pelo uso do sistema de transcrição tradução in vidro de fragmentos gênicos obtidos por PCR. Aspectos relativos à replicação viral serão obtidos em protoplastos inoculados com vírus ou RNAs virais. (AU)