Caracterizacao da dnase da peconha da serpente bothrops alternatus: comparacao com a dnase acida de mamiferos envolvida em apoptose.

• Processo: 05/59620-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2006
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2009
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Toxicologia
• Pesquisador responsável: Stephen Hyslop
• Beneficiário: Stephen Hyslop
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Médicas (FCM). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Venenos de serpentes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bothops (Alternatus) | Purificacao, Caracterizacao | Veneno De Serpente

Resumo

As desoxirribonucleases (DNases) são endonucleases presentes em peçonhas de serpentes que hidrolisam ácido desoxirribonucléico (DNA). Sua ação no envenenamento ocorre em conjunto com outras enzimas que quebram ligações fosfato (ATPases, 5-nucleotidases, fosfodiesterases, ribonucleases). Vários estudos sobre endonucleases em mamíferos sugerem que a DNase II (DNase ácida) seria responsável pela fragmentação do DNA durante a apoptose. É também conhecido que peçonhas são capazes de induzir apoptose em células. Neste trabalho propomos purificar a DNase II presente na peçonha de Bothrops alternatus, utilizando uma combinação de cromatografias de gel filtração, troca iônica e afinidade, e caracterizá-la quanto a propriedades físico-químicas, imunológicas e enzimáticas. Avaliaremos a atividade pró-apoptótica desta DNase através dos métodos de fragmentação de DNA e expressão de anexina V, Bcl-2, caspases e p53, comparando-a com DNases ácidas de mamíferos que são envolvidas no processo (AU)