Efeitos da produção de espécies reativas de oxigênio nas membranas do espermatozóide equino resfriado a 5°.C

• Processo: 05/60592-2
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2006
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2007
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Rubens Paes de Arruda
• Beneficiário: Rubens Paes de Arruda
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Espermatozoides animal Equinos Preservação do sêmen Membrana celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Equino | Eros | Fosfocaseinato Nativa | Membranas | Plasma Seminal | Semen Resfriado

Resumo

O sêmen equino é muito utilizado na forma resfriada, porém para alguns garanhões a longevidade espermática é baixa. Durante a armazenagem do sêmen há a formação de espécies reativas de oxigênio (EROs), porém esta pode ultrapassar a capacidade dos antioxidantes presentes no sêmen, causando a peroxidação lipídica das membranas, que leva à perda de sua integridade, prejuízos na função celular e queda na motilidade espermática. Este experimento será realizado para avaliar os efeitos da produção de EROs nas membranas espermáticas durante o resfriamento. Para isso serão utilizados cinco garanhões submetidos a sete colheitas de sêmen (n=35). Logo após a colheita o sêmen será avaliado quanto ao volume, motilidade (CASA), concentração, características morfológicas espermáticas, integridade de membranas e produção de EROs. Em seguida o sêmen será dividido em duas aliquotas, uma receberá um diluidor base de leite desnatado e outra um diluidor que contém a proteína do leite fosfocaseinato nativa. As alíquotas serão diluídas a 25 x 106 espermatozóides/mL, então subdivididas em duas, uma que será submetida à centrifugação para retirada do plasma seminal e outra que permanecerá sem centrifugação. Os quatro tratamentos serão submetidos às análises computadorizadas do sêmen (CASA), da morfologia espermática (DIC), da produção de EROs (C11-BODIPY581/591) e análise das membranas plasmática, acrossomal e mitocondrial (PI/FITC-PSA/JC-1), sendo estas duas últimas análises realizadas no microscópio de epifluorescência e no citômetro de fluxo. O sêmen será submetido ao resfriamento, quando então serão repetidas as análises supracitadas às 24, 48, 72 horas. (AU)