Uso de antioxidantes no meio diluente Tris para refrigeração e congelação de células espermáticas provenientes de epidídimo de cães submetidos à orquiectomia eletiva

• Processo: 10/09666-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2012
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Wilter Ricardo Russiano Vicente
• Beneficiário: Wilter Ricardo Russiano Vicente
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Assunto(s): Medicina veterinária preventiva Espermatozoides animal Preservação do sêmen Antioxidantes Sêmen animal
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cão | epidídimo | espermatozóides | N-acetil-cisteína | radicais livres | vitamina E | Preservação de Espermatozóides

Resumo

O objetivo do presente estudo será testar se a suplementação do meio diluente com dois antioxidantes, utilizando-os em separado ou associados, em diferentes concentrações, possibilita ou não a melhora na qualidade de preservação das células espermáticas nos processos de refrigeração e congelação. Utilizar-se-ão 21 unidades experimentais (UE), constituídas, cada uma delas, por um "pool" de recuperado espermático de três cães hígidos (totalizando 63 animais), submetidos à orquiectomia eletiva. Estas serão divididas em três grupos constituídos por sete UE cada. O grupo I (GI), o grupo II (GII) e o grupo III (GIII) que terão a adição de antioxidantes nas concentrações de 0,5mM, 2,5mM e 5mM, respectivamente. Para cada grupo far-se-ão em um primeiro momento a avaliação dos espermatozóides a fresco, quanto à motilidade, vigor, teste vital e morfologia espermática utilizando a coloração descrita por POPE et al. (1991). Ainda, a integridade de membrana será avaliada por meio do teste hiposmótico e coloração por sondas fluorescentes, serão também mensurados as quantidades de espécies reativas de oxigênio (ROS), a atividade mitocondrial pelo teste de atividade citoquímica (DAB) e será realizado o teste de termo resistência (TTR). Ato contínuo, cada UE será dividida em quatro alíquotas de igual volume e estas serão centrifugadas; o sobrenadante desprezado e o concentrado de espermatozóides ressuspendido em meio diluente TRIS (PEÑA E LINDE-FORSBERG, 2000), modificado por MARTINS (2005), acrescido de Vitamina E, N-acetil-cisteína ou a associação de ambas. Cada alíquota será dividida em duas, uma para refrigeração (por 48 horas) e outra para congelação. Todas as diluições serão novamente avaliadas a fresco, após os períodos de refrigeração e descongelação. Os resultados obtidos serão avaliados por meio de análise de variância para médias repetidas com posterior avaliação pelo teste Tukey (p<0,05). (AU)