Estudo da diferenciacao in vitro de celulas tronco embrionarias murinas (mesc) transfectadas pelo gene do hormonio do crescimento bovino (bgh) e producao de animais quimeras.

• Processo: 07/55968-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2010
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Joaquim Mansano Garcia
• Beneficiário: Joaquim Mansano Garcia
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 09/14830-0 - Estudo da Diferenciação in vitro de células tronco embrionárias murinas (MESC) transfectadas pelo gene do hormônio do crescimento bovino (BGH) e produção de animais quimeras, BP.TT; 09/02998-3 - Estudo da diferenciação in vitro de células tronco embrionárias murinas (mesc) transfectadas pelo gene do hormônio do crescimento bovino (bGH) e produção de animais quimeras, BP.TT; 08/06588-1 - Estudo da diferenciação in vitro e in vivo na produção de animais quiméricos e teratocarcinomas em animais imunodeprimidos com células tronco embrionárias murinas, BP.TT
• Assunto(s): Diferenciação celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Diferenciacao Celular | Murinos | Quimeras

Resumo

O uso de células tronco embrionárias murinas (mESC) para desenvolvimento de pesquisas voltadas à produção de quimeras e diferenciação celular representa um avanço significativo nos estudos em produção animal, além de prestar-se como modelo para futuros trabalhos com aplicação a engenharia de tecidos e medicina regenerativa em seres humanos. O presente trabalho tem por objetivo a produção de animais quimeras com linhagens selvagens e mESC transfectadas pelo gene do hormônio do crescimento bovino (bGH), a avaliação do grau de quimerismo dos animais obtidos, a confirmação da pluripotencialidade da linhagem além da utilização de protocolos para diferenciação das mESC em diferentes tecidos. Para tanto, mESC transfectadas pelo bGH serão cultivadas indiferenciadas sobre tapete celular de fibroblasto primário fetal murino e injetadas em blastocistos receptores, que serão transferidos ao útero de receptoras pseudo-prenhas e os animais nascidos avaliados quanto ao grau de quimerismo pela detecção do polimorfismo mitocondrial pela técnica de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) através de marcador mtDNA das linhagens NZB e C57/BI.6, de genótipo equilibrado 40 XY. Serão injetadas mESC no tecido subcutâneo de camundongos imunossuprimidos, visando a formação de teratomas compostos de tipos celulares oriundos dos três folhetos embrionários. Paralelamente, serão testados protocolos para diferenciação espontânea e induzida das mESC em diferentes tipos celulares. (AU)