Estudo da expressão temporal de osteopontina e sua influência na mineralização de culturas osteogênicas sobre nanotopografia de titânio

• Processo: 10/50925-2
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2010
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2013
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Paulo Tambasco de Oliveira
• Beneficiário: Paulo Tambasco de Oliveira
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Osteogênese Osteopontina Titânio Imunofluorescência
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Culturas Osteogenicas | Mineralizacao | Nanotopografia | Osteopontina | Rnam | Titanio

Resumo

Estudos iniciais demonstraram aumento na imunodetecção de osteopontina (OPN) citoplasmática e extracelular e aceleração e/ou aumento de formações nodulares de matriz mineralizada em culturas osteogênicas sobre titânio (Ti) com nanotopografia. Visando aprofundar os conhecimentos em relação a esses achados, os objetivos do presente projeto são: verificar se as evidências de imunomarcação mais intensa para OPN em culturas osteogênicas sobre nanotopografia estão relacionadas ao aumento no nível de expressão de RNAm e de proteína, em diferentes tempos experimentais e verificar o efeito da inibição da expressão de OPN sobre o processo de mineralização da matriz extracelular (MEC). As células serão obtidas por digestão enzimática de calvária de ratos recém-nascidos e cultivadas em superfícies de titânio com nanotopografia ou usinadas. Nos tempos de 4, 7 e 10 dias pós-plaqueamento serão avaliados e comparados os seguintes parâmetros: 1) Quantificação da expressão de RNAm para OPN por PCR em tempo real, 2) Quantificação da expressão de OPN por ELISA e 3) Imunolocalização de OPN por imunofluorescência indireta. O silenciamento da OPN será realizado no tempo de 6 horas pós-plaqueamento, por RNA de interferência e seu efeito sobre a mineralização da MEC será avaliado nos tempos de 10 e 14 dias. (AU)