Purmorfamina em cultura de células osteoblásticas: efeito sobre pré-osteoblastos, osteoblastos e vias de sinalização intracelular.

• Processo: 07/06675-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2008
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2010
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Bioquímica e Molecular
• Pesquisador responsável: Adalberto Luiz Rosa
• Beneficiário: Adalberto Luiz Rosa
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Diferenciação celular Peptídeos e proteínas de sinalização intracelular Sinalização intracelular Cultura de células Expressão gênica Biologia molecular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biologia molecular | cultura de células | diferenciação celular | expressão gênica | purmorfamina | sinalização intracelular | Biologia do tecido ósseo

Resumo

A investigação de novas moléculas capazes de estimular a formação óssea poderá levar a descoberta de novos agentes terapêuticos para o tratamento da osteoporose e de traumatismos ósseos, bem como, de terapia complementar na reabilitação de pacientes edêntulos. Além disso, pode auxiliar na elucidação dos mecanismos moleculares envolvidos no processo de formação e reabsorção óssea. Existem evidências de que a purmorfamina estimula a osteogênese em linhagens celulares modulando as vias de sinalização Hedgehog (Hh) e Wingless (Wnt). Entretanto, até o presente momento, nenhum estudo foi realizado para avaliar se o efeito da purmorfamina se dá na indução da diferenciação de pré-osteoblastos, na estimulação da atividade celular de osteoblastos diferenciados ou em ambas. Portanto, o objetivo desse estudo será investigar o efeito da purmorfamina sobre a osteogênese pela avaliação do perfil de expressão gênica de células mesenquimais da medula óssea humana em diferentes estágios da diferenciação osteoblástica. Além disso, será estudada a participação das vias de sinalização Hh e Wnt na expressão gênica induzida pela purmorfamina. Células mesenquimais serão caracterizadas em culturas celulares menos diferenciadas (pré-osteoblastos) e mais diferenciadas (osteoblastos) e avaliado o efeito da purmorfamina em cada uma dessas culturas por meio de citometria de fluxo e Real-time PCR. A participação das vias Hh e Wnt será verificada por Real-time PCR e por drogas antagonistas dessas vias. Os experimentos serão realizados utilizando separadamente células de pelo menos três doadores diferentes e os dados serão submetidos à análise de variância (ANOVA) seguida do teste de Bonferroni ou ao teste t, quando apropriado. (AU)