| Processo: | 09/53958-1 |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Data de Início da vigência: | 01 de março de 2010 |
| Data de Término da vigência: | 30 de junho de 2012 |
| Área do conhecimento: | Ciências da Saúde - Odontologia - Periodontia |
| Pesquisador responsável: | Marcia Pinto Alves Mayer |
| Beneficiário: | Marcia Pinto Alves Mayer |
| Instituição Sede: | Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil |
| Município da Instituição Sede: | São Paulo |
| Bolsa(s) vinculada(s): | 10/07542-5 - Análise da expressão de fimbria e cápsula em amostras de Porphyromonas gingivalis., BP.TT |
| Assunto(s): | Porphyromonas gingivalis Fatores de virulência Periodontite Expressão gênica |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Capsula | Expressao Genica | Fatores De Virulencia | Fimbria | Periodontite | Porphyromonas Gingivalis |
Resumo
Introdução: Porphyromonas gingivalis, associado à periodontite crônica, apresenta diversidade que poderia refletir sua virulência. Embora as fímbrias sejam envolvidas na interação da bactéria com células epiteliais e outros substratos, algumas amostras capsuladas consideradas virulentas em modelos animais, não expressam a fimbria, sendo sua expressão regulada por um Complexo sistema de dois componentes FimSR. Objetivo: testar a hipótese de que variações na região promotora e na expressão de fimS entre diferentes amostras de P. gingivalis influenciariam a expressão de fímbrias. Será determinada a seqüência da região promotora de fimS de linhagens de P. gingivalis caracterizadas por PFGE e avaliada a expressão das fímbrias. Estes dados serão relacionados à expressão dos genes fimS, pg2130 e fimA e às seqüências da região promotora de fimS e sua expressão. Também será avaliada a presença de cápsula e determinada a relação entre fenótipo K+ea estrutura populacional de P. gingivalis. Métodos: serão analisadas 25 cepas de P. gingivalis previamente genotipadàs com base em fimA. Como controle, serão analisadas as cepas ATCC33277 (fimbriada, genótipo fimA I, K-) e W83 (afinbriada, genótipo fimA IV, K1). A região promotora de firnS será seqüenciada e a transcrição de finS, pg2130 e fimA será determinada in vitro e após contato com célula epitelial. A expressão de FimA será monitorada por Western blot e a presença de fimbria determinada por microscopia eletrônica. Além disso será analisada a capacidade de auto agregação através do ensaio de hidrofobicidade; presença da cápsula por microscopia óptica; detecção do lócus de biossíntese do polissacarídeo capsular (BPC) e genótipo associado ao sorotipo K1, que é o mais virulento. Estes dados serão comparados com a estrutura filogenética da população estudada, através de MLST e PFGE. (AU)
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