Analise da expressao de fimbria e capsula em amostras de porphyromonas gingivalis

Resumo

Introdução: Porphyromonas gingivalis, associado à periodontite crônica, apresenta diversidade que poderia refletir sua virulência. Embora as fímbrias sejam envolvidas na interação da bactéria com células epiteliais e outros substratos, algumas amostras capsuladas consideradas virulentas em modelos animais, não expressam a fimbria, sendo sua expressão regulada por um Complexo sistema de dois componentes FimSR. Objetivo: testar a hipótese de que variações na região promotora e na expressão de fimS entre diferentes amostras de P. gingivalis influenciariam a expressão de fímbrias. Será determinada a seqüência da região promotora de fimS de linhagens de P. gingivalis caracterizadas por PFGE e avaliada a expressão das fímbrias. Estes dados serão relacionados à expressão dos genes fimS, pg2130 e fimA e às seqüências da região promotora de fimS e sua expressão. Também será avaliada a presença de cápsula e determinada a relação entre fenótipo K+ea estrutura populacional de P. gingivalis. Métodos: serão analisadas 25 cepas de P. gingivalis previamente genotipadàs com base em fimA. Como controle, serão analisadas as cepas ATCC33277 (fimbriada, genótipo fimA I, K-) e W83 (afinbriada, genótipo fimA IV, K1). A região promotora de firnS será seqüenciada e a transcrição de finS, pg2130 e fimA será determinada in vitro e após contato com célula epitelial. A expressão de FimA será monitorada por Western blot e a presença de fimbria determinada por microscopia eletrônica. Além disso será analisada a capacidade de auto agregação através do ensaio de hidrofobicidade; presença da cápsula por microscopia óptica; detecção do lócus de biossíntese do polissacarídeo capsular (BPC) e genótipo associado ao sorotipo K1, que é o mais virulento. Estes dados serão comparados com a estrutura filogenética da população estudada, através de MLST e PFGE. (AU)