Influência do consumo de álcool em osteoblastos de fetos de ratas tratadas

• Processo: 10/50338-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2011
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Clínica Odontológica
• Pesquisador responsável: Rosilene Fernandes da Rocha
• Beneficiário: Rosilene Fernandes da Rocha
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FOSJC). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José dos Campos. São José dos Campos , SP, Brasil
• Assunto(s): Consumo de bebidas alcoólicas Citotoxicidade Metabolismo ósseo Osteoblastos Cultura primária de células Ratos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Alcool | Calvaria | Citotoxicidade | Cultura Celular | Osteoblastos | Ratos

Resumo

O álcool, além de atuar no organismo trazendo várias patologias, atua no metabolismo ósseo por ação direta causando um efeito antiproliferativo nos osteoblastos. O objetivo deste trabalho é avaliar o efeito citotóxico do consumo crônico de álcool a 20% em cultura celular de osteoblastos de fetos de ratos recém nascidos, cujas mães foram tratadas com o álcool. Para tanto serão utilizados 30 ratas prenhas divididas em grupos conforme a dieta: 10 animais tratados com álcool a 20%, 10 pertencentes ao grupo isocalórico correspondente as calorias ingeridas pelo grupo do álcool, e 10 animais tratados com água e ração à vontade. Após os 21 dias de gestação os filhotes com dois a três dias de vida serão sacrificados por decapitação para retirada da calvária. A partir desta será realizado o isolamento de células da linhagem osteoblástica por meio de digestão enzimática sequencial através da utilização de solução de tripsina a 0,25%, e o desenvolvimento de cultura primária osteogênica. Os osteoblastos serão cultivados por períodos de até 14 dias, em Meio Essencial Mínimo, modificação alfa, com L-glutamina e nessas placas de cultura serão realizados os testes para avaliar o efeito citotóxico do álcool baseado na adesão, proliferação e viabilidade celular, no conteúdo de proteína total, na atividade da fosfatase alcalina e na formação de nódulos de mineralização. Os dados numéricos dos procedimentos com cultura de células serão submetidos à análise estatística não-paramétrica para duas amostras independentes, utilizando-se o teste de Mann-Whitney. Na avaliação da adesão celular será utilizado o teste t-Student. A formação de nódulos de mineralização será expressa como uma porcentagem da área total. (AU)