Avaliação de biofilmes multiespécie formados em diferentes substratos e expostos a concentrações salivares de agentes antimicrobianos: quantificação de microrganismos e morfologia tridimensional do biofilme

• Processo: 10/07894-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2013
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Clínica Odontológica
• Pesquisador responsável: Altair Antoninha Del Bel Cury
• Beneficiário: Altair Antoninha Del Bel Cury
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 10/15625-8 - Avaliação de biofilmes multiespécie formados em diferentes substratos e expostos a concentrações salivares de agentes antimicrobianos: quantificação de microrganismos e morfologia tridimensional do biofilme, BP.TT
• Assunto(s): Prótese dentária Resinas sintéticas Biofilmes Hidroxiapatita Antibióticos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: antibiotico | Antifúngico | Biofilme oral | hidroxiapatita | Resina acrílica | titânio | Prótese Dental

Resumo

A formação e acúmulo de biofilme em substratos presentes na cavidade oral é o principal fator etiológico das doenças bucais. Estudos avaliando biofilme multiespécie são escassos e muito pouco se conhece da organização tridimensional das espécies presentes no biofilme e das alterações que poderiam ocorrer no mesmo na presença de antimicrobianos excretados na saliva. O objetivo deste estudo será avaliar biofilme multiespécie formado em substratos presentes na cavidade oral quando expostos a concentrações salivares de diferentes agentes antimicrobianos. Serão utilizados espécimes de três substratos: hidroxiapatita, titânio e resina acrílica. Após a mensuração da rugosidade de superfície e esterilização por óxido de etileno, os espécimes serão acondicionados em placa de 24 poços para a formação da película adquirida. Em seguida será acrescentado meio fluido universal (FUM) contendo inóculo dos 6 microrganismos a serem estudados: Actinomyces naeslundii, Veillonella dispar, Fusobacterium nucleatum, Streptococcus sobrinus, Streptococcus oralis e Candida albicans. As placas serão incubadas em anaerobiose a 37º C até completar a formação de um biofilme de 72 h. Em seguida os espécimes serão imersos em meio FUM contendo um dos agentes antimicrobianos (azitromicina, metronidazol ou fluconazol) por 24 h. Para mensuração das células viáveis, o biofilme será removido dos substratos através de sonicação (7 watts, 30 segundos) em solução tampão fosfato (PBS). Essa solução será diluída serialmente em PBS e plaqueada nos meios de cultura ágar sangue Columbia, ágar Mitis Salivarius, ágar Fastidious Anaerobe e ágar Biggy. Após incubação, as contagens das unidades formadoras de colônia (UFC) serão realizadas com o auxílio de um microscópio estereoscópico e expressas em UFC/mm2. A visualização das espécies em cores distintas dentro do biofilme será realizada através da Hibridização in situ por Fluorescência (FISH) e observação em microscopia confocal a laser. As contagens de UFC e a microscopia confocal serão realizadas no biofilme formado (baseline) e após a imersão em agente antimicrobiano. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DE LUCENA-FERREIRA, SILVIA CARNEIRO; RICOMINI-FILHO, ANTONIO PEDRO; DA SILVA, WANDER JOSE; CURY, JAIME APARECIDO; DEL BEL CURY, ALTAIR ANTONINHA. Influence of daily immersion in denture cleanser on multispecies biofilm. CLINICAL ORAL INVESTIGATIONS, v. 18, n. 9, p. 2179-2185, DEC 2014. (10/07894-9)

CAUALCANTI, I. M. G.; RICOMINI FILHO, A. P.; LUCENA-FERREIRA, S. C.; DA SILVA, W. J.; PAES LEME, A. F.; SENNA, P. M.; DEL BEL CURY, A. A.. Salivary pellicle composition and multispecies biofilm developed on titanium nitrided by cold plasma. ARCHIVES OF ORAL BIOLOGY, v. 59, n. 7, p. 695-703, JUL 2014. (10/07894-9, 11/03242-0)