Estudo do papel da reação em cadeia da polimerase (PCR) em biópsias endomiocárdicas para o diagnóstico precoce da reativação da Doença de Chagas após o transplante cardíaco

• Processo: 09/50181-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2011
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
• Pesquisador responsável: Luiz Alberto Benvenuti
• Beneficiário: Luiz Alberto Benvenuti
• Instituição Sede: Instituto do Coração Professor Euryclides de Jesus Zerbini (INCOR). Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP (HCFMUSP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Doença de Chagas Recidiva Trypanosoma cruzi Transplante de coração Reação em cadeia por polimerase (PCR) Diagnóstico precoce Técnicas de diagnóstico molecular Imuno-histoquímica

Resumo

A reativação da doença de Chagas (RDC) após o transplante cardíaco é complicação relativamente frequente, apesar de sua baixa letalidade. Seu diagnóstico é muitas vezes difícil, e quando a mesma ocorre no miocárdio o aspecto histológico da biópsia endomiocárdica (BEM) é muito semelhante ao que ocorre na rejeição aguda celular, com infiltrado inflamatório mononuclear e agressão dos cardiomiócitos. A distinção entre as duas entidades, de tratamento radicalmente diferente, reside apenas na identificação do parasita ou de restos do mesmo no quadro de RDC (miocardite chagásica). Neste projeto pretendemos fazer uma avaliação crítica do papel da reação em cadeia da polimerase (PCR) para o DNA do T. cruzi em BEM para o diagnóstico da RDC, visando sua incorporação ao nosso arsenal de métodos diagnósticos, pela comparação de seus resultados com os métodos atualmente utilizados para a pesquisa do parasita, muito mais econômicos, quer sejam a avaliação detalhada de cortes corados pelo HE e a imunohistoquímica (IHQ). Para tanto serão examinadas BEM anteriores e posteriores à data da RDC de 10 pacientes, sendo que 5 deles apresentaram acometimento cardíaco, 3 da pele, 1 do sangue e 1 do sistema nervoso central. A presença parasitária nas BEM será analisada por três métodos, a saber: 1) visualização direta de formas amastigotas em lâminas coradas pelo HE; 2) positividade em reação de IHQ e 3) positividade em reação de PCR (serão realizados 2 testes por BEM, um com primers visando o DNA nuclear e outro com primers visando o DNA do cinetoplasto). Verificar-se-á a capacidade de cada método (HE, IHQ ou PCR) de diagnosticar a RDC e a precocidade com que cada um o realiza, quer na situação de RDC no miocárdio ou fora dele. Será verificada a eventual associação da positividade da BEM para o T. cruzi pelos diferentes métodos e o grau do processo inflamatório do miocárdio (expresso pelo grau da rejeição). Como grupo controle utilizaremos 18 BEM de 6 pacientes chagásicos transplantados cardíacos e que não apresentaram RDC na evolução. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BENVENUTI, LUIZ A.; ROGGERIO, ALESSANDRA; COELHO, GUILHERME; FIORELLI, ALFREDO I.. Usefulness of qualitative polymerase chain reaction for Trypanosoma cruzi DNA in endomyocardial biopsy specimens of chagasic heart transplant patients. JOURNAL OF HEART AND LUNG TRANSPLANTATION, v. 30, n. 7, p. 799-804, JUL 2011. (09/50181-6)