Pesquisa de estratégias terapêuticas em células transformadas por papilomavírus humano

• Processo: 10/20054-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2013
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Aurora Marques Cianciarullo
• Beneficiário: Aurora Marques Cianciarullo
• Instituição Sede: Instituto Butantan. São Paulo , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: São Paulo
• Pesquisadores associados: Dirce Sakauchi
• Bolsa(s) vinculada(s): 13/08321-0 - Pesquisa de estratégias terapêuticas em células transformadas por papilomavírus humano., BP.TT
• Assunto(s): Neoplasias Carcinoma Papillomavirus Oncoproteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: imunocitoquímica ultra-estrutural | imunofluorescência | Isolamento mitocondrial | Transformação celular | ultra-estrutura celular | Morfologia

Resumo

Os carcinomas cervicais expressam as oncoproteínas E6 e E7 de Papilomavírus Humano (HPV) de alto-risco, neutralizando a supressão tumoral. A oncoproteína E6 codificada pelo vírus é multifuncional, apresentando inúmeros alvos celulares; entretanto, ainda não está claro se todas essas atividades estão relacionadas à malignidade do tumor. Neste estudo pretendemos avaliar a distribuição de onconproteínas virais E6 e E7, mitocôndrias, receptor de transferrina (TfR), transferrina (Tf), ferritina (Fe), clatrina, citocromo c, porina e F0F1 ATPase, em células humanas transformadas e não-transformadas por HPV, para um padrão de endocitose de ferro em células humanas e animais, como uma via alternativa de infecção por HPV. Linhagens celulares HPV-negativas serão transfectadas com vetores contendo as seqüências completas dos genes E6 e E7, sendo então usadas como controle positivo. As células serão analisadas em ensaios de imunofluorescência, fracionamento celular e isolamento da fração mitocondrial, realizados em células HPV-positivas e HPV-negativas, para imunocitoquímica ultraestrutural e western blotting. Os fatores anti-apoptogênicos detectados serão avaliados e explorados como estratégias terapêuticas no desenvolvimento de vacina contra o câncer cervical e anogenital. (AU)