Amostras de Shiga-toxins Escherichia coli (STEC) isoladas em São Paulo de bovinos, suínos, humanos e alimentos de origem animal, utilizando a separação imuno-magnética: fatores de virulência e freqüência dos sorotipos O111: H-, O118: H16 e O157: H7

• Processo: 00/11574-8
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2001
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2003
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Zootecnia
• Pesquisador responsável: Antonio Fernando Pestana de Castro
• Beneficiário: Antonio Fernando Pestana de Castro
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Escherichia coli Toxina Shiga Sorotipagem Separação imunomagnética Reação em cadeia por polimerase (PCR) Técnica de amplificação ao acaso de DNA polimórfico
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Fezes | Pcr E Rapd | Separacao Imuno Magnetica | Stec

Resumo

O projeto tem como alvo isolar amostras de E. coli portadoras dos genes eae e stxs de material fecal de bovinos, suínos, humanos e alimentos de origem animal, no Estado de São Paulo. Os materiais serão examinados pela técnica de separação imunomagnética e semeadura em meios seletivos para O157. Alternativamente será usada a semeadura em meio de MacConkey e da zona de crescimento confluente, examinando por PCR, indutos bacterianos, usando iniciadores específicos para stx1, stx2, eae, rfbO111, rfbO157, EHEC-Hly. A determinação de antígenos H será feita, nos sorotipos acima, pelo fliC, amplificado com iniciadores para este lócus e tratamento com enzimas de restrição e examinando o perfil de bandas obtidas. Com todas as amostras stx+ eae+ serão feitos o FAS, inserção de LEE e o RAPD, incluindo-se também neste último teste as amostras somente stx+. Estudos de aderência em HEp-2 serão também feitos... (AU)