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Estudo do mecanismo molecular da progesterona e do estradiol sobre o início da puberdade em novilhas Nelore

Processo: 11/13852-0
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2011
Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2013
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Zootecnia - Produção Animal
Pesquisador responsável:Luis Felipe Prada e Silva
Beneficiário:Luis Felipe Prada e Silva
Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Ruminantes  Gado Nelore  Hormônios esteroides gonadais  Progesterona  Expressão gênica 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:expressão gênica | Hipotálamo | Ovário | progesterona | Puberdade | Criação de Ruminantes

Resumo

A elucidação dos mecanismos moleculares pelos quais nutrição, genética e tratamentos hormonais alteram o início da puberdade é de fundamental importância para o desenvolvimento de estratégias que reduzam a idade ao primeiro parto, e consequentemente a taxa de desfrute do rebanho Nelore. Serão investigados os efeitos de implante de progesterona, e do estradiol endógeno, sobre mecanismos moleculares controlando a obtenção da puberdade de novilhas Nelore pré-púberes. Especificamente, as vias moleculares de sinalização da leptina, do estradiol, e do NPY serão estudadas no hipotálamo, e as vias do IGF-I, do GH e do LH serão estudadas no ovário. Trinta e seis novilhas Nelores não púberes, e com idade entre 13 e 14 meses, serão divididas em quatro grupos experimentais (nove por grupo): implante de P4 sem estradiol (P-E); implante de P4 com estradiol (P+E); sem implante de P4 e sem estradiol (E-); e sem implante de P4 e com estradiol (E+). As novilhas serão mantidas sob pastejo, com fornecimento de sal mineral e água à vontade. Ao término do tratamento hormonal todas as novilhas serão abatidas e o hipotálamo e ovário extraídos para análise. Os ovários serão submetidos ao isolamento das células da granulosa e estas serão armazenadas a -80 ºC. O RNA total será extraído, tratado com DNAse I e submetido à síntese de cDNA para estudo da expressão gênica por PCR em tempo real (qPCR). Um total de 14 genes candidatos serão quantificados por qPCR. Um estudo abrangente da administração de progesterona e do efeito do estrógeno endógeno será realizado através do sequenciamento de nova geração (RNA-Seq), de forma a identificar possíveis genes candidatos no hipotálamo. Os resultados obtidos por RNA-Seq serão validados pela quantificação por qPCR da expressão de 10 genes diferencialmente expressos. (AU)

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