Caracterização endócrina, molecular e ultrassonográfica da atividade ovariana após o tratamento com diferentes indutores de ovulação e durante a luteólise completa e parcial em éguas

• Processo: 12/12288-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2015
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Cezinande de Meira
• Beneficiário: Cezinande de Meira
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: Botucatu
• Pesquisadores associados: José Buratini Junior
• Assunto(s): Éguas Fenômenos reprodutivos fisiológicos Indução da ovulação Gonadotrofina coriônica Luteólise Folículo ovariano Ultrassonografia Doppler Western blotting Reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa (RT-PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: angiogenese | égua | perfil hormonal | Rt-Pcr | Ultrassonografia Doppler | Western blot | Fisiologia da Reprodução

Resumo

Os principais objetivos do presente estudo serão 1) avaliar o efeito de diferentes indutores de ovulação sobre a hemodinâmica folicular e o perfil plasmático de LH, 2) descrever o efeito de baixas doses de hCG sobre a funcionalidade do corpo lúteo (CL) e 3) quantificar a expressão de fatores angiogênicos do CL e o perfil hormonal de éguas durante a luteólise parcial e completa. No Experimento 1, vascularidade folicular e concentração de LH serão avaliadas durante as 48 horas prévias à ovulação utilizando 24 éguas (n=8 éguas/grupo) tratadas com 2500UI de hCG, 1,5mg de deslorelina ou 2mL de NaCl 0,9%. No Experimento 2, 24 éguas (n= 6 éguas/grupo; 4 grupos) serão utilizadas para avaliar o efeito de subdoses de hCG sobre a vascularidade de folículos pré-ovulatórios. No Experimento 3, os status funcional e estrutural do CL pós-tratamento com hCG serão avaliados. Para tanto, 60 éguas serão divididas em 10 grupos de acordo com o dia de tratamento e dose de hCG. Nos Experimentos 4 e 5, 56 éguas (28 éguas e 4 grupos/experimento; n=7 éguas/grupo) serão tratadas com solução salina ou diferentes doses de PGF2± durante a luteogênese (Exp.4) e na fase de manutenção do CL (Exp.5). Serão avaliados a perfusão sanguínea do CL e concentração plasmática de progesterona (P4). Exame ultrassonográfico Doppler do CL e coleta de sangue serão realizados a cada 24 horas a partir do dia da ovulação (D0) até o dia de detecção da luteólise completa. Adicionalmente, os parâmetros serão avaliados a cada 6 horas e durante 48 horas a partir do momento do tratamento. No Experimento 6, serão utilizados 5 grupos (n=7 éguas/grupo) de éguas tratadas com solução salina ou com doses de PGF2± necessárias para induzir a luteólise completa ou parcial durante a luteogênese (D2) e fase de manutenção do CL (D8). Coleta de sangue de hora em hora durante as primeiras 48 horas pós-tratamento será realizado para mensuração da concentração plasmática de P4, PGFM, prolactina, LH, estrógeno e ocitocina. No Experimento 7, fragmentos de CL de 72 éguas tratadas com diferentes doses de PGF2± serão coletadas por biópsia para quantificar a expressão gênica e proteica de fatores angiogênicos (VEGFA, VEGFR-1, VEGFR-2, Ang-1, Ang-2, receptor Tie-2, NO, eNOS, iNOS, GUCY1B3 e HIF-1±) presentes no tecido luteal durante a luteólise parcial ou completa através de RT-PCR e Western blot. Para tanto, biópsias de CL e coleta de sangue serão realizados nas horas 0, 6 e 24 pós-tratamento. Somente uma amostra de tecido luteal por animal será coletada. (AU)