Identificação e determinação da localização celular das subunidades do exossomo em testículos de Lithobates catesbeianus (rã touro)

• Processo: 12/51200-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2015
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Juliana Silva da Luz
• Beneficiário: Juliana Silva da Luz
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Assunto(s): Ciclo celular Exossomos Eucariotos RNA Reprodução animal Espermatogênese Rã-touro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ciclo Celular | Espermatogenese | Exossomo | Localizacao | Reproducao | Rna

Resumo

O exossomo é um complexo de exoribonucleases com atividade 3'-5' presente em vários organismos, de archaea a eucariotos superiores, envolvido em processamento e degradação de RNAs. Em Archaea, o exossomo é formado por três subunidades diferentes, sendo duas com domínios de RNase PH, e uma com dois domínios de ligação a RNA. Dados estruturais do exossomo de Archaea, mostram que as duas subunidades com domínios de RNase PH, aRrp41 e aRrp42, formam heterodímeros, responsáveis pela catalise, e três dímeros formam o anel de RNases PH, ao qual três moléculas de aRrp4 e/ou aCsl4 (ligação a RNA) se ligam. Análise de sequências das subunidades, dados de interação proteína-proteína, análise dos complexos por microscopia eletrônica e dados estruturais indicam que os complexos do exossomo de diferentes organismos possuem estruturas básicas semelhantes ao de archaea. Em eucariotos, entretanto, o exossomo é composto por onze subunidades diferentes, seis delas formam o anel de RNases PH, três possuem domínios de ligação a RNA e interagem ; com o topo do anel e outras duas são RNases hidrolíticas, que interagem com diferentes regiões do complexo. Contudo, para muitos organismos ainda não se dispõe de dados sobre a composição e organização estrutural do exossomo. Recentemente, estudos de imunolocalização do exossomo em levedura, sugerem que as proteínas que constituem o complexo podem ter localizações diferentes durante o processo de divisão celular. Além disso, a subunidade Rrp44p é essencial para a correta segregação dos cromossomos, enquanto que Rrp6p participa da divisão meiótica, indicando que a atividade do exossomo é importante no controle da divisão celular. Este projeto tem como principal objetivo a caracterização do exossomo em eucariotos durante a meiose, utilizando para isso o sistema reprodutor de rãs touro, organismo onde o exossomo não foi ainda descrito, e, avaliar a localização e níveis de expressão das proteínas do complexo em tecido testicular, o que possibilitará esta avaliação em células somáticas e germinativas. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

PRIETO, MARCELA B.; GEORG, RAPHAELA C.; GONZALES-ZUBIATE, FERNANDO A.; LUZ, JULIANA S.; OLIVEIRA, CARLA C.. Nop17 is a key R2TP factor for the assembly and maturation of box C/D snoRNP complex. BMC MOLECULAR BIOLOGY, v. 16, MAR 18 2015. (10/51842-3, 12/51200-7)

LUZ, J. S.; CANEGUIM, B. H.; BAGGIO, A.; SANTONI, M. M.; HELBING, C. C.; VALENTINI, S. R.; SASSO-CERRI, E.; OLIVEIRA, C. C.. Differential expression of RNA exosome subunits in the amphibian Lithobates catesbeianus during reproductive and non-reproductive periods. BMC RESEARCH NOTES, v. 12, p. 7-pg., 2019-01-21. (12/51200-7, 12/23845-3, 14/21383-8, 10/51842-3)