Confiabilidade e validade do método de plaqueamento em rastro para quantificação de colônias de espécies de Candida

• Processo: 13/03863-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2013
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2015
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Lívia Nordi Dovigo
• Beneficiário: Lívia Nordi Dovigo
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FOAr). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Denise Madalena Palomari Spolidorio
• Assunto(s): Microbiologia aplicada Candida Células-tronco
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Candida spp | confiabilidade | Unidades formadoras de colônias | validade | Bioestatística; Microbiologia Aplicada

Resumo

O método do espalhamento em placas (MEP) tem sido amplamente utilizado para quantificação do número de unidades formadoras de colônia por mililitro (ufc/mL) de espécies de Candida. No entanto, problemas de despesa e tempo para a execução dessa técnica são fatores que muitas vezes limitam a avaliação de grandes números de amostras clínicas ou laboratoriais. O método de plaqueamento em rastro (MPR) foi proposto para a quantificação de espécies bacterianas e possui importantes vantagens em relação ao MEP, como simplicidade de execução e o menor volume de placas descartáveis e meio de cultura. Apesar de ser amplamente utilizado, não são encontrados relatos que tenham verificado a confiabilidade e a validade do MPR para o plaqueamento e quantificação de espécies de Candida. A literatura aponta a existência de variações nas contagens de micro-organismos de uma mesma amostra quando diferentes métodos de plaqueamento são empregados ou quando diferentes pesquisadores aplicam o mesmo método. Quando negligenciadas, tais variações podem afetar negativamente as conclusões dos estudos e tornar difícil a comparação de resultados de diferentes autores, principalmente os que buscam avaliar a eficácia de terapias antimicrobianas. Assim, este estudo irá avaliar a validade e a confiabilidade do MPR para a quantificação do número de ufc/mL de diferentes espécies de Candida. Trata-se de estudo experimental duplo-cego, realizado em laboratório. Como variáveis dependentes têm-se o número de ufc/mL e o tempo do procedimento em minutos (plaqueamento e contagem das colônias). Como variáveis independentes têm-se o método de plaqueamento (MEP ou MPR), a concentração do micro-organismo (102; 103; 104; 105; 106 e 107 ufc/mL) e a espécie de Candida (C. albicans, C. glabrata, C. tropicalis e C. krusei). A reprodutibilidade intra e inter-examinadores assim como a concordância entre os diferentes métodos de plaqueamento será estimada por meio do Coeficiente de Correlação Intraclasse. As medidas do tempo (minutos) serão analisadas por meio de estatística descritiva, seguida de Análise de Variância a dois critérios. O nível de significância a ser adotado para tomada de decisão será de 5%. (AU)