Efeito da crotoxina sobre a funcionalidade de neutrófilos diferenciados in vitro a partir de progenitores mielóides

• Processo: 13/11302-8
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2013
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2015
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia Geral
• Pesquisador responsável: Maria Cristina Cirillo
• Beneficiário: Maria Cristina Cirillo
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Primavera Borelli Garcia ; Sandra Coccuzzo Sampaio Vessoni
• Assunto(s): Crotoxina Fagocitose Neutrófilos Citoesqueleto Células progenitoras mieloides Migração transendotelial e transepitelial Resposta inflamatória
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: adesão | Citoesqueleto | crotoxina | fagocitose | migração transendotelial | neutrófilo | progenitor mielóide | Fisiologia Geral

Resumo

Em estudo recente demonstramos que a crotoxina (CTX) inibe in vitro e in vivo o processo de fagocitose por neutrófilos, sendo o efeito in vivo prolongado, uma vez que o mesmo pode ser observado até 14 dias após a administração subcutânea de uma única dose de CTX. Ainda, demonstramos que esse efeito está associado à diminuição da fosforilação de resíduos de tirosina em proteínas sinalizadoras e ao comprometimento da reorganização adequada do citoesqueleto da célula. Considerando a vida média curta dos neutrófilos e a rápida eliminação da CTX após a sua administração, é difícil explicar essa ação inibitória prolongada. Nesse sentido, dados preliminares mostram que a CTX inibe a fagocitose por neutrófilos maduros obtidos da medula óssea 14 dias após a administração subcutânea da toxina. Uma possível hipótese para explicar sua ação prolongada seria o fato de que essa toxina poderia alterar a funcionalidade dos neutrófilos durante o seu processo de maturação. Assim, dando continuidade a essa linha de pesquisa, o objetivo desse projeto é investigar o efeito da CTX sobre a atividade funcional dos neutrófilos diferenciados in vitro a partir dos seus progenitores mieloides. Para tanto, estes progenitores serão isolados da medula óssea de animais pré-tratados com CTX e após a sua diferenciação, in vitro, em células maduras, serão avaliados os seguintes parâmetros: a) transmigração em células endoteliais t.End.1; b) adesão celular a proteínas de matriz extracelular; c) fagocitose de partículas de zimosan opsonizadas com C3bi; d) expressão da molécula do receptor CR3 (CD11b/CD18) e) expressão de moléculas sinalizadoras, tais como, fosfotirosina, pSyk, pVav1, RhoA, Rac1, Cdc42 e Arp 2/3. Esse estudo contribuirá para elucidação dos mecanismos envolvidos na ação prolongada da CTX sobre a resposta inflamatória. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

LIMA, TATIANE S.; NEVES, CAMILA L.; ZAMBELLI, VANESSA O.; LOPES, FLAVIA S. R.; SAMPAIO, SANDRA C.; CIRILLO, MARIA CRISTINA. Crotoxin, a rattlesnake toxin, down-modulates functions of bone marrow neutrophils and impairs the Syk-GTPase pathway. Toxicon, v. 136, p. 44-55, SEP 15 2017. (13/11302-8)