Albumin is synthesized in epididymis and aggregates in a high molecular mass glycoprotein complex involved in sperm-egg fertilization.

• Processo: 14/17284-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2014
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2015
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Saúde Materno-infantil
• Pesquisador responsável: Luís Antônio Violin Dias Pereira
• Beneficiário: Luís Antônio Violin Dias Pereira
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Andrologia Espectrometria de massas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Albumin | Epididymis | Fertilization | mass spectrometry | Sperm-egg interactions | Andrologia

Resumo

O epidídimo possui um importante papel na maturação do esperma para a fertilização, mas pouco se sabe sobre as moléculas envolvidas nesse processo. Nosso grupo de pesquisa previamente descreveu o padrão de expressão de um antígeno nas células epiteliais epididimárias reativo ao anticorpo monoclonal (aMc) TRA 54. Análises de imunohistoquímica e imunoblotting sugeriram que o epítopo do antígeno epididimário envolve um motivo de carboidrato, liberado no lumen de maneira andrógeno-dependente, o qual se liga ao espermatozoide luminal. A partir de cromatografia de coluna e SDS-PAGE com digestão in situ e espectroscopia de massa, identificou-se uma proteína reconhecida pelo aMc TRA 54 nas células epiteliais epididimárias. A proteína de ~65 kDa é parte de um complexo de alto peso molecular (~260 kDa). O sequenciamento de aminoácidos da proteína reconhecida pelo aMc TRA 54 corresponde à albumina. Imunoprecipitados com o aPc anti-albumina continham o antigeno reconhecido pelo aMc TRA 54, indicando que a molecula epididimária reconhecida era de fato a albumina. Ensaios de RT-PCR detectaram RNAm de albumina no epidídimo e ensaios de fertilização in vitro revelaram que o complexo glicoproteíco contendo albumina estava envolvido na abilidade do espermatozoide em reconhecer e penetrar a zona pelúcida do óocito. Juntamente, esses resultados indicam que a albumina derivada do epidídimo participa na formação de um complexo glicoprotéico de alto peso molecular que desempenha uma função importante na fertilização do óócito pelo espermatozoide. (AU)