Avaliação de polimorfismos de DNA mitocondrial em pacientes obesos respondedores ou não ao tratamento clínico

• Processo: 14/17097-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2014
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2016
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina
• Pesquisador responsável: João Eduardo Nunes Salles
• Beneficiário: João Eduardo Nunes Salles
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Médicas da Santa Casa de São Paulo (FCMSCSP). Fundação Arnaldo Vieira de Carvalho. São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Carlos Alberto Longui ; Nilza Maria Scalissi
• Assunto(s): Endocrinologia Obesidade DNA mitocondrial Polimorfismo genético Análise de sequência de DNA Eletroforese
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: DNA mitocondrial | genética | obesidade | Polimorfismo | Endocrinologia

Resumo

A obesidade vem crescendo em todo o mundo em ritmo de epidemia. A etiologia da obesidade é complexa, multifatorial, resultando da interação de genes, ambiente, estilos de vida e fatores emocionais. O metabolismo celular, crescimento e balanço energético estão relacionados à eficiência mitocondrial. Portanto, variantes genéticas do DNA mitocondrial (DNAmt) podem estar envolvidas no gasto energético individual, tendo relação direta com o peso. A análise da sequência do DNAmt ou técnicas utilizando amplificação por PCR podem ser ferramentas utilizadas para a detecção dessas variantes, permitindo correlacionar alterações entre DNAmt, gasto energético e índice de massa corporal (IMC). Numa população de obesos, iremos avaliar os polimorfismos do DNAmt e iremos comparar com uma população com IMC normal.Para isso, selecionaremos 50 obesos que fazem acompanhamento regular no ambulatório de Obesidade, comprando com um grupo controle de 50 indivíduos. De cada sujeito do estudo será colhida uma amostra de 5ml de sangue periférico. Para a identificação de polimorfismos no DNA mitocondrial será utilizado um sistema de resequenciamento baseado em PCR que permite identificar variações na região hipervariável do genoma mitocondrial humano. O método consiste em 5 etapas utilizando kit mitoSEQr" Resequencing System for the Human Mitochondrial Genome, Applied Biosystems": 1) A obtenção do DNA (genômico e mitocondrial) a partir de células linfomonocitárias de sangue periférico. 2) Determinar a concentração de DNA extraído através da leitura em espectrofotômetro em comprimento de onda de A260. 3) Reação de amplificação das sequências do DNAm PCR. 4) Purificação da Reação de Sequenciamento. 5) Eletroforese. (AU)