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Desenvolvimento de novos antibióticos contra cepas super-resitentes de Staphylococcus aureus: identificação e caracterização de inibidores da enzima Diadenilato Ciclase

Processo:15/21583-0
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2016
Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2019
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
Pesquisador responsável:Marcos Vicente de Albuquerque Salles Navarro
Beneficiário:Marcos Vicente de Albuquerque Salles Navarro
Instituição Sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
Município da Instituição Sede:São Carlos
Pesquisadores associados:Artur Torres Cordeiro
Assunto(s):Cristalografia de raios X 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:c-di-AMP | Cristalografia de raios X | Desenvolvimento de inbidores | high throughput screening | Infecções multiresistentes | Desenvolvimento de inibidores

Resumo

Recentemente, uma molécula baseada em nucleotídeos, a adenosina dimérica cíclica (c-di-AMP), foi identificada em várias bactérias patogênicas, ganhando rapidamente o status de um sinalizador central no controle de diversos processos bacterianos essenciais, tais como transporte iônico e vigilância a danos no DNA. Em Staphylococcus aureus, verificou-se que c-di-AMP é essencial para homeostase da parede celular e resistência aos estresses ambientais. De forma similar às mais estudadas vias de sinalização mediadas por c-di-GMP, a biossíntese de c-di-AMP envolve as atividades enzimáticas antagônicas de ciclases e fosfodiesterases específicas das famílias de domínios DAC (diadenilato ciclase) e DHH/DHHA1, respectivamente. Embora a estrutura de uma proteína verificadora da intergridade de DNA (DisA), que possui um domínio ativo DAC, já tenha sido determinada, pouco é conhecido a respeito da ativação dessas enzimas e até mesmo do mecanismo catalítico desse domínio. Nosso grupo recentemente determinou a estrutura da única diadenilato ciclase de S. aureaus (Sa_DacA) e revelou seu mecanismo catalítico. O presente projeto extende o conhecimento acumulado no grupo e visa a implementação de ensaios enzimáticos adequados para processos automatizados de identificação de inibidores específicos de DAC de S. aureaus em diferentes bibliotecas de compostos. Os compostos bioativos encontrados nessa triagens em larga escala serão caracterizados com respeito a mecanismos de inibição e potencia inibitória. Preve-se ainda a determinação estrutural de complexos enzima-inibidor para compreensão dos determinantes de reconhecimento molecular. Ensaios in vivo serão implementados para avaliação das atividades bactericidas ou bacteriostáticas dos inibidores identificados em cepas super-resitentes de S. aureaus. Os resultados gerados nesse projeto podem servir de base para estudos futuros e desenvolvimento de novos antibióticos, que em combinação com os tratamentos atualmente disponíveis pode levar ao controle das infecções até mesmo das formas mais resistentes de S. aureus. (AU)

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Publicações científicas
(As publicações científicas contidas nesta página são originárias da Web of Science ou da SciELO, cujos autores mencionaram números dos processos FAPESP concedidos a Pesquisadores Responsáveis e Beneficiários, sejam ou não autores das publicações. Sua coleta é automática e realizada diretamente naquelas bases bibliométricas)
SASTRE, DIEGO E.; BASSO, LUIS G. M.; TRASTOY, BEATRIZ; CIFUENTE, JAVIER O.; CONTRERAS, XABIER; GUEIROS-FILHO, FREDERICO; DE MENDOZA, DIEGO; NAVARRO, MARCOS V. A. S.; GUERIN, MARCELO E.. . Journal of Biological Chemistry, v. 295, n. 7, p. 2136-2147, . (16/05203-5, 15/21583-0, 14/00206-0, 14/13411-1)
SASTRE, DIEGO E.; PULSCHEN, ANDRE A.; BASSO, LUIS G. M.; PARIENTE, JHONATHAN S. BENITES; MARQUES NETTO, CATERINA G. C.; MACHINANDIARENA, FEDERICO; ALBANESI, DANIELA; NAVARRO, MARCOS V. A. S.; DE MENDOZA, DIEGO; GUEIROS-FILHO, FREDERICO J.. . Journal of Biological Chemistry, v. 295, n. 7, p. 2148-2159, . (16/05203-5, 15/21583-0, 14/00206-0, 14/13411-1)