Criogel Monolítico de Acrilamida/Alginato com o-Fosfotirosina (OPT) Imobilizado como Fase Estacionária para Purificação de IgG Humana

• Processo: 16/10855-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2016
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2018
• Área do conhecimento: Engenharias - Engenharia Química - Processos Industriais de Engenharia Química
• Pesquisador responsável: Sonia Maria Alves Bueno
• Beneficiário: Sonia Maria Alves Bueno
• Instituição Sede: Faculdade de Engenharia Química (FEQ). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Biotecnologia Purificação Imunoglobulina G Cromatografia de afinidade
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: criogel | cromatografia de afinidade | IgG | purificação | Biotecnologia

Resumo

O emprego de anticorpos nas áreas analítica, diagnóstico, biossensores, proteômica e terapêutica têm crescido nas últimas décadas e movimentado um mercado de U$ 70 bilhões por ano, representando cerca de 6% da receita da indústria farmacêutica mundial. Na área terapêutica, são requeridos grandes doses de preparações homogêneas de anticorpos por paciente, portanto, a purificação dessas moléculas em larga escala é fundamental. Dado que os processos de purificação disponíveis são, de maneira geral, multietapas, longos, de alto custo e com baixo rendimento, justifica-se a necessidade do estudo de técnicas que promovam bom rendimento e produtividade para purificá-los. Um dos recentes desenvolvimentos neste campo é a cromatografia em leitos monolíticos, pois estes apresentam propriedades adequadas para a bioseparação em larga escala, uma vez que apresentam baixa resistência ao fluxo através da coluna e a transferência de massa é governada principalmente por convecção. Este projeto visa o desenvolvimento de um adsorvente monolítico macroporoso a base de poliacrilamida e alginato, preparado pela técnica de crio-polimerização para ser empregado para a purificação de IgG humana. Após ativação com epicloridrina, o ligante pseudobioespecífico OPT será imobilizado no criogel, uma vez que nosso grupo de pesquisa demonstrou que este ligante adsorveu seletivamente IgG a partir do plasma humano (projeto financiado pela FAPESP). O desenvolvimento de criogel a base de poliacrilamida e alginato está sendo proposto devido ao baixo custo e as propriedades hidrofílicas desses materiais. Os criogéis preparados a base de poliacrilamida e alginato serão caracterizados quanto à porosidade, morfologia, absorção de água e permeabilidade hidráulica. A seletividade e a identificação da porção da IgG (Fab ou Fc) adsorvida no OPT imobilizado também serão investigadas. Alguns parâmetros importantes para ampliação de escala, como capacidade máxima e constante de dissociação do complexo OPT-IgG e a capacidade dinâmica do adsorvente serão determinados. (AU)

Publicações científicas

(4)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

MARCUZ, CAMILA; MOURAO, CECILIA ALVES; HAUPT, KARSTEN; ALVES BUENO, SONIA MARIA. Performance of phospho-L-tyrosine immobilized onto alginate/ polyacrylamide-based cryogels: Effect of ligand coupling on human IgG adsorption and Fab fragments separation. JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B-ANALYTICAL TECHNOLOGIES IN THE BIOMEDICAL AND LIFE SCIENCES, v. 1165, FEB 15 2021. (17/21751-5, 16/10855-1)

MOURAO, CECILIA ALVES; MARCUZ, CAMILA; HAUPT, KARSTEN; ALVES BUENO, SONIA MARIA. Polyacrylamide-alginate (PAAm-Alg) and phospho-L-tyrosine-linked PAAm-Alg monolithic cryogels: Purification of IgG from human serum. JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B-ANALYTICAL TECHNOLOGIES IN THE BIOMEDICAL AND LIFE SCIENCES, v. 1129, OCT 15 2019. (16/10855-1, 17/21751-5)

FIORAVANTE, IGOR FERREIRA; BUENO, SONIA MARIA ALVES. Performance of polyacrylamide-alginate-based cryogel for IgG purification from bovine serum by IMAC. Process Biochemistry, v. 118, p. 12-pg., 2022-07-01. (16/10855-1)

MARCUZ, CAMILA; MOURAO, CECILIA ALVES; HAUPT, KARSTEN; ALVES BUENO, SONIA MARIA. Performance of phospho-L-tyrosine immobilized onto alginate/polyacrylamide-based cryogels: Effect of ligand coupling on human IgG adsorption and Fab fragments separation. JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B-ANALYTICAL TECHNOLOGIES IN THE BIOMEDICAL AND LIFE SCIENCES, v. 1165, p. 12-pg., 2021-01-21. (17/21751-5, 16/10855-1)