Clonagem de genes induzidas por atch (hormonio adrenocorticotropico) e fgf2 (fibroblast growth factor) em celulas adrenais y1 de camundongos.

• Processo: 00/02697-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2005
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica
• Pesquisador responsável: Hugo Aguirre Armelin
• Beneficiário: Paula Fontes Asprino
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 97/12755-1 - Atividade mitogênica e transdução do sinal do hormônio adrenocorticotrópico (ACTH), AP.TEM
• Assunto(s): Clonagem Sequenciamento
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bibliotecas Subtraidas | Clonagem | Genes Raros | Sequenciamento

Resumo

O objetivo deste projeto é clonar genes induzidos por ACTH e FGF2 na linhagem Y1 de células adrenocorticais de camundongo. Células Y1 serão carenciadas para soro, fazendo com que o ciclo celular seja bloqueado na interfase Go/G1. Estas células deverão ser estimuladas com ACTH (hormônio adrenocorticotrópico) e FGF2 (fibroblast growth factor) na presença de cicloheximida, para que sejam expressos apenas os genes de resposta primária. O RNA será extraído pela técnica de trizol e posteriormente será obtido apenas o mRNA poly(A)+, por colunas de oligod(T). Pela técnica de hibridização por supressão subtrativa serão geradas bibliotecas de cDNA nas quais espera-se encontrar um grande número de genes expressos em pequena abundância na célula. O cDNA obtido deverá ser inserido em um vetor adequado. Será então feito o seqüenciamento, e os ESTs obtidos serão comparados com os dados presentes no banco de genes internacional. Desta maneira, espera-se encontrar genes diferencialmente expressos em resposta a estímulos distintos, no caso ACTH e FGF2, bem como evidenciar genes envolvidos no controle do ciclo celular de células adrenocorticais. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

ASPRINO, Paula Fontes. Análise de expressão gênica por microarrays de cDNA em linhagens de células adrenais tumorigênicas tratadas com FGF2 e ACTH. 2006. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ) São Paulo.