Efeito de solutos neutros na estabilizacao de estados intermediarios de enovelamento de citocromo-c.

• Processo: 94/01579-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 1994
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 1996
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Marcio Francisco Colombo
• Beneficiário: Alexandre Cesar Dourado Neves
• Instituição Sede: Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José do Rio Preto. São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Hidratação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Citocromo-C | Enovelamento Proteico | Hidratacao

Resumo

Um aspecto pouco explorado no problema do enovelamento protéico é o da contribuição da água no balanço das interações proteína-proteína / proteína-água para a estabilização de estruturas protéicas. Nossa proposição é investigar o efeito de solutos neutros (sorbitol, sacarose e poli etileno glicol) sobre as características da desnaturação ácida e renaturação do Citocromo-C por espectroscopia de absorção no visível. Resultados já obtidos demonstraram: a) que sorbitol estabiliza parcialmente o Cit-C contra desnaturação estabilizando um estado intermediário compacto com características de Glóbulo Derretido (Molten Globule); b) que este efeito se deve primariamente ao efeito de diminuição da atividade de água com o aumento da concentração de sorbitol e não a ligação preferencial do soluto à proteína, que por sua vez tem permitido c) determinar o número de moléculas de água liberadas na transição proteína desnaturada - glóbulo derretido induzida no intervalo de pH 2.0-2.8. Pretende-se: a) reconfirmar estes resultados: b) caracterizar o grau de compactação deste estado realizando-se medidas de dicroísmo circular, fluorescência e viscosidade para compará-lo com o estado de GD estabilizados pela ligação de aníons descritos na literatura; c) determinar o número de prótons liberados nesta transição, e; d) estender estes estudos para outros solutos neutros. (AU)