Espermatozoide bovino como vetor de transgene: efeito da estrutura e do tamanho do dna exogeno na internalizacao no nucleo do espermatozoide.

• Processo: 03/10234-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2004
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2006
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Mayra Elena Ortiz D' Avila Assumpcao
• Beneficiário: Weber Beringui Feitosa
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Bovinos Peixes Espermatozoides Transgenia Incubação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bovino | Espermatozoide | Fish | Incubacao | Transgenia

Resumo

A transferência de gene é usada para produção de animais transgênicos. Assim animais podem ser usados como modelos para estudos básicos ou aplicados, produção de animais para uso farmacêutico e produção de órgãos para xenotransplante. Entre as técnicas utilizadas para a produção de animais transgênicos está o uso de espermatozóides como vetor de DNA exógeno. Entretanto os baixos índices de produção de animais transgênicos e as diferenças de resultados entre laboratórios justificam constantes estudos para tornar a técnica mais eficiente e menos- onerosa. Este projeto tem como objetivo avaliar o efeito da estrutura e do tamanho da seqüência do DNA exógeno na internalização em espermatozóides bovinos. Serão preparados seqüências de DNA exógeno de 3 tamanhos diferentes (1,7 e 15 kb) para cada tamanho duas estruturas diferentes (uma rica em AT e outra rica em GC), totalizando 6 tratamentos. Os vetores serão clonados no plasmídeo pGEM-3Z (Promega) e serão construídos através de.reações baseadas no mapa de restrições das seqüências e transfectados em espermatozóides pela incubação. Após incubação os espermatozóides serão lavados em meio TALP-sêmen e submetido à hibridização in situ fluorescente (FISH) para avaliação da internalização do DNA exógeno no núcleo dos espermatozóides. (AU)

Publicações científicas

(4)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

FEITOSA‚ W.B.; DA ROCHA‚ A.M.; MENDES‚ C.M.; PECORA‚ M.. Kinetics of changes in plasma membrane related to apoptosis and necrosis in bovine sperm cells at different incubation times. Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science, v. 45, n. 5, p. 398-404, 2008. (03/07456-8, 03/10234-7)

FEITOSA, W. B.; MENDES, C. M.; MILAZZOTTO, M. P.; ROCHA, A. M.; MARTINS, L. F.; SIMOES, R.; PAULA-LOPES, F. F.; VISINTIN, J. A.; ASSUMPCAO, M. E. O. A.. Exogenous DNA uptake by bovine spermatozoa does not induce DNA fragmentation. Theriogenology, v. 74, n. 4, p. 563-568, SEP 1 2010. (03/10234-7, 03/07456-8)

FEITOSA, WEBER BERINGUI; ILAZZOTTO, MARCELLA PECORA; MENDES, CAMILLA MOTA; DA ROCHA, ANDRE MONTEIRO; AVANZO, JOSE LUIS; MARTINS, ELIZABETH ANGELICA LEME; VISINTIN, JOSE ANTONIO; ASSUMPCAO, MAYRA ELENA ORTIZ D'AVILA. Exogenous DNA length and quantity affect the transfection rate, but not sperm viability during Sperm-Mediated Gene Transfer. GENE REPORTS, v. 29, p. 7-pg., 2022-09-11. (03/10234-7, 03/07456-8)

FEITOSA, WEBER BERINGUI; MILAZZOTTO, MARCELLA PECORA; SIMOES, RENATA; ROVEGNO, MARIANA; NICACIO, ALESSANDRA CORALO; NASCIMENTO, ANIBAL BALLAROTTI; ARRUDA GONCALVES, JOSE SERGIO; VISINTIN, JOSE ANTONIO; ORTIZ D'AVILA ASSUMPCAO, MAYRA ELENA. Bovine sperm cells viability during incubation with or without exogenous DNA. ZYGOTE, v. 17, n. 4, p. 315-320, NOV 2009. (03/10234-7, 03/07456-8)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

FEITOSA, Weber Beringui. Espermatozóide bovino como vetor de transgene: interação do DNA exógeno e viabilidade espermática. 2006. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ/SBD) São Paulo.