Caracterização do papel do 17beta-estradiol e do antiestrógeno ICI 182,780 sobre a expressão de genes relacionados com modelagem de matriz extracelular, transporte iônico e capacitação espermática, em dúctulo eferente de rato

• Processo: 06/58672-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2007
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Bioquímica e Molecular
• Pesquisador responsável: Maria de Fátima Magalhães Lazari
• Beneficiário: Gisele Renata de Oliveira Gomes
• Instituição Sede: Instituto Nacional de Farmacologia (INFAR). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 03/10132-0 - Estrógeno e neurotransmissão colinérgica muscarínica: expressão de receptores, sinalização intracelular e suas interações no sistema nervoso central e no trato reprodutor masculino, AP.PRNX.TEM
• Assunto(s): Estrógenos Expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Crisp 1 | Ductulo Eferente | Estrogeno | Expressao Genica | Ici 182,780 | Matrilisina

Resumo

Os dúctulos eferentes possuem importante papel na reabsorção do fluido testicular e concentração do fluido espermático e são especialmente sensíveis à ação do estrógeno (E2). Animais knockout para o receptor de E2 ERalfa ou animais tratados com o antiestrógeno puro ICI 182,780 (ICI), apresentam um defeito no desenvolvimento dos ductulos eferentes e são inférteis. Foi anteriormente utilizado em nosso laboratório um modelo de ratos tratados com o ICI, e a regulação da expressão de cerca de 30000 genes no dúctulo eferente foi avaliada em microarrays de cDNA. Ao lado do efeito esperado de um antagonista de E2 sobre a regulação gênica, o tratamento com antiestrógeno também elevou a expressão de alguns genes regulados positivamente por E2, entre eles a metaloproteinase 7 (MMP7), que teve sua expressão aumentada em 14X. Desde que tem sido demonstrado que E2 e ICI podem ativar o receptor acoplado a proteína G GPR30, é de fundamental importância esclarecer se a alteração da expressão gênica observada com ICI é resultado de um bloqueio de receptores clássicos de E2 ou de um efeito agonista direto do ICI. Além disso, é importante verificar se essa ação direta do ICI também se estende a outros genes. Para isso, trataremos animais e culturas primárias de dúctulo eferente com E2, ICI ou inibidor de aromatase e verificaremos a repercussão sobre genes relacionados com modelagem de matriz (MMP7), capacitação espermática (CRISP1) e transporte iônico (CFTR), por RT-PCR quantitativo e Western blot. (AU)