Expressão, purificação e teste de cristalização de proteína atrl12 (RNase l inhibitor) de Arabidopsis thaliana, uma supressora de silenciamento por RNA

• Processo: 07/52895-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Marcos Roberto de Mattos Fontes
• Beneficiário: Edmarcia Elisa de Souza
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Cristalografia de proteínas Expressão de proteínas Purificação de proteínas Arabidopsis thaliana
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cristalizacao | Expressao | Rinase L Inhibitor | Silenciamento Por Rna

Resumo

A "RNase L inhibitor" (RLI) é uma proteína altamente conservada sendo produzida por praticamente todos os organismos dos domínios Eukaryota e Archaea. A RLI foi primeiramente identificada em humanos, onde mostrou ser uma reguladora da via 2-5A synthase/RNase L, entretanto esta via só existe em tetrápodes, indicando que a mesma deve desempenhar um outro papel comum a todos esses organismos. Duas novas funções têm sido descritas para RLI em outros organismos, uma relacionada à ligação com proteínas ribossomais e iniciação de tradução e a outra relacionada ao controle do silenciamento por RNA. Tanto o silenciamento por RNA como a via 2-5A synthase/RNase L são vias de resposta a dsRNA, desempenhando papéis fundamentais como regulação da expressão gênica e resistência a vírus. A RLI também desperta uma ampla gama de interesses, pois além do que já foi descrito, ela atua no ciclo infeccioso de vírus como HIV e o ECMV, bem como, em doenças como a síndrome de fadiga crônica. Apesar disso, até hoje pouco foi feito de concreto para determinar suas atividades bioquímicas e propriedades estruturais, portanto, se sabe muito pouco sobre seu mecanismo de ação. Este projeto tem por objetivo expressar, purificar e fazer testes de cristalização da proteína AtRLI2 e seus domínios isolados, visando realizar testes iniciais de cristalização para futuramente resolver suas estruturas tridimensionais. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

SOUZA, Edmarcia Elisa de. Clonagem, expressão e purificação de domínios da proteína AtRLI2 (RNase L Inhibitor), um supressor endógeno de silenciamento por RNA de Arabidopis thaliana, visando estudos estruturais. 2010. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Instituto de Biociências. Botucatu Botucatu.