Regeneracao de nucleotideos beta-nicotinamida adeninicos soluveis ou imobilizados em sistemas com enzimas acopladas.

• Processo: 07/56763-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2008
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Michele Vitolo
• Beneficiário: Diana Zukas Andreotti Viana
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Reatores biológicos Imobilização
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bioconversao | Biorreatores | Cofatores | Imobilizacao | Reator Continuo Com Membrana

Resumo

As bioconversões executadas com enzimas que requerem como cofator a forma reduzida (NADPH ou NADH) ou oxidada (NADP ou NAD) de nucleotídeos Beta-nicotinamida adenínicos são limitadas pela eficiência com que esta substância é mantida na forma particular requerida pelo catalisador ao longo de toda a reação, assim como pela sua recuperação no final do processo. A interconversão NADP (NAD)ZNADPH (NADH) será efetuada pela ação simultânea da glicose 6-fosfatodesidrogenase de Saccharomyces cerevisiae ou Leuconostoc mesenteroides (G6PDH) [NADP (NAD) + D-glicose 6-fosfato (G6P) → NADPH (NADH) + ácido 6-fosfoglicônico] e da glutamato desidrogenase de Cândida utilis ou bovina (GLUDH) [NADPH (NADH) + 2-oxoglutarato + NH4+ → NADP (NAD) + L-giutamato + H2O]. As bioconversões serão feitas em biorreatores descontínuo e contínuo com membrana (BM). O cofator será usado na forma solúvel (quando for usado o BM usar-se-á membrana de 500 Da) ou imobilizado em resina aniônica DOWEX (caso em que no BM usar-se-á membrana de 100 kDa). Serão variados os parâmetros: a) Imobilização do cofator tipo de resina, razão mássica cofator (reduzido ou oxidadoyresina, pH e tempo de contato; b) Bioconversão: b.1) Descontínua: temperatura, pH, agitação, concentrações de 2-oxoglutarato, G6P, NADP, NAD, NH4+, G6PDH e GLUDH; b.2) Contínua: vazão específica de alimentação (D), sob as melhores condições definidas no processo descontínuo. Os objetivos a serem alcançados são dispor do cofator mobilizado na forma reduzida (NADPH/NADH) ou oxidada (NADP/NAD) para uso nas bioconversões catalisadas por enzimas que os requerem e viabilizar o emprego de um reator capaz de operar com as enzimas solubilizadas e com o cofator tanto na forma solúvel quanto imobilizada. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

VIANA, Diana Zukas Andreotti. Regeneração de nucleotídeos β-nicotinamida adenínicos solúveis ou imobilizados em sistemas com enzimas acopladas. 2010. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ) São Paulo.